升级款细胞电转仪LE+
升级款细胞电转仪LE+ (11-0101) 可用于转染多种哺乳动物细胞系，特别是PBMC模式，具有高效、低毒的特点。它可以维持高水平的T细胞存活，允许免疫治疗应用，如CAR和TCR T细胞生成和CRISPR敲低T细胞基因。电压范围300 – 1500v;适用于20ul, 100ul, 120ul和200ul电穿孔管。
- 产品参数
- 文献
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| 货号 | 11-0101 |
|---|---|
| 产品名称 | 升级款细胞电转仪LE+ |
| 供货商名称 | CELETRIX公司 |
| 品牌名 | Celetrix |
| 概述 | 升级款T细胞电穿孔仪LE+(11-0101)是细菌电穿孔仪 |
| 运输 | 升级款细胞电转仪LE+ (11-0101)可以常温运输。 |
| 稳定性与储存 | 升级款细胞电转仪LE+ (11-0101)可以室温存放。 |
| 注意事项 | 产品将从中国境内仓库发货。偶有促销活动。 |
| 产品咨询 | 如果需要报价、试用或者任何技术或其它问题，欢迎随时联系我们：武汉多找找科技有限公司，企业微信：duozhaozhao_2017，联系电话：181 6266 0842 |
描述
11-0101: CeletrixT细胞电穿孔仪LE+
1、新增细胞系模式和PBMC模式;
2、电压范围 300 – 1500 伏;
3、新模式优化大质粒电转的细胞存活率和转染效率
4、可适配20ul、100ul、200ul电击管
Celetrix细胞电转仪操作简单，参数单一可调；
适用于哺乳动物细胞，DNA, RNA, siRNA或蛋白质；
集成示波器，电流脉冲显示。
T细胞电穿孔仪是唯一一种保持高水平细胞存活和扩增的细胞电转仪，允许免疫疗法应用，如CAR-T, TCR-T生成和CRISPR敲除T细胞基因。用其他方法很难转染人源T细胞，尤其是质粒。使用我们的细胞电穿孔仪LE+和细胞电穿孔仪EX+， T细胞可以随时从新鲜的PBMC阶段转染到刺激或培养阶段。与市场上任何其他电穿孔转染方法相比，使用我们的细胞瞬时转染T细胞效率是最高的。
例如，使用我们的细胞电穿孔仪，使用GFP质粒转染人源，PBMC系统转染效率可达80%以上。PBMC经SB转座子系统表达CAR-T2A-GFP14天后，表达率为65.9%，细胞形成簇状，增殖能力与未电穿孔细胞相似。
病毒载体一直是免疫治疗的主要递送载体，因为其他现有的电穿孔方法与免疫细胞表现不佳。我们的新型高性能电穿孔技术可快速电穿孔未受刺激的PBMC细胞，并支持快速细胞扩增，使临床T细胞转染CAR-T治疗成为可能。
Celetrix电转仪在CRISPR/Cas9基因编辑领域的应用
使用Celetrix电转方法，我们可以将RNP(Cas9蛋白和gRNA复合物)或者Cas9质粒导入细胞，进行高效基因编辑。
RNP电转对于细胞的毒性很小，基因敲除效率一般可以达到90%以上，可以适用于几乎所有的细胞种类。对于T细胞、NK细胞等原代细胞和各种干细胞，Cas9质粒电转有较大毒性，我们推荐使用RNP进行基因编辑。
原代T细胞不管是未刺激的PBMC或者刺激培养的T细胞都可以使用RNP进行高效基因编辑，只要调节各自所需的电压就可以。PBMC直接做基因编辑，需要使用PBMC模式，使用较高的电压。而刺激2-3天的T细胞在细胞系模式下用较低电压就可以电转RNP。比如TCR敲除的实验，我们使用2-3天刺激培养的T细胞，可以达到92%的CD3敲除效率，细胞生长状态和未电转的对照细胞相似。
T细胞、NK细胞和造血干细胞的基因编辑在基因治疗领域比较重要，我们有成熟的方案可以帮助您快速完成实验。另外，我们也有单次电转10ml的大体积电转仪可以单次处理10E9量级的细胞。
对于iPSC细胞，电转RNP也是使用细胞系模式，简单调节电压就可以达到高效率。比如在AAVS1和OCT4基因位点上，使用RNP电转可以达到较高的敲除效率。如果需要进一步提高敲除效率，可以使用较高浓度的RNP，比如在20ul电击管里面使用10ug的Cas9蛋白和5ug的gRNA
使用质粒电转进行基因编辑，适合于普通细胞系。带Cas9基因和gRNA的质粒一般分子量比较大，电转时具有一定的毒性，但是细胞系生长速度快可以承受。由于质粒进行基因编辑效率比RNP低，一般需要进行加药筛选，提高基因编辑的效率。加药筛选有两种方案，一种是常规的长时间筛选，得到的细胞会稳定表达Cas9蛋白和gRNA，同时带有编辑的基因。THP-1细胞使用我们的辅助试剂电转Cas9-gRNA-GFP-Puro质粒后，经过长期筛选可以得到全部GFP阳性的细胞，这些细胞的基因编辑也已经大部分完成 。
使用质粒电转的方法做基因编辑一般需要时间比较长。由于Celetrix电转效率高并且细胞存活率高，我们有另一种特殊的快速筛选方法在质粒瞬转阶段完成高效基因编辑。得到的细胞带有高效基因编辑，并且不带质粒上的gRNA和筛选标记，方便进行另一个基因的编辑。
Celetrix电穿孔T细胞免疫治疗
传统转染方法对于T细胞非常困难，特别是对于质粒的转染。
Celetrix新一代电转技术可以高效转染从新鲜PBMC到刺激培养阶段的T细胞。与其他电转技术相比，Celetrix电转技术具有最高的效率。同时，我们的技术也具有最高的细胞存活率，并且细胞在电转后能够和未电转细胞一样正常扩增。使用Celetrix电转仪使得CAR-T，TCR-T制备、CRISPR介导的基因编辑等变得容易。
PBMC使用普通GFP质粒电转结果与流式分析图
普通GFP质粒电转24h后效率大于80%
PBMC使用SB转座子系统表达CAR-T2A-GFP结果
转座子–4天
转座子–14天
转座子–20天
PBMC电转转座子14天后的CAR表达效率为65.9%，
并且细胞状态和未电转的一样稳定快速聚集生长
电转染技术——未来CAR-T治疗的趋势
电转染 |
慢病毒转染 |
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| 转染效率 | 高 | 低 |
| 技术成本 | 低 | 很高 |
| 转染周期 | 时间短，可以瞬间完成电转 | 过程较长 |
| 毒理与副作用 | 细胞膜破坏 毒理简单 | 基因插入位置问题 |
Celetrix细胞电转仪:
Celetrix基础款细胞电穿孔仪SP100, 货号：11-0103, 简化单脉冲所有细胞类型;适用于20ul和100ul电穿孔管。
Celetrix升级款细胞电穿孔仪LE+, 货号：11-0101, 新的细胞系模式和PBMC模式，适用于20ul, 100ul, 120ul和200ul电穿孔管。
Celetrix升级款细胞电穿孔仪EX+, 货号：11-0106, 新的细胞系模式和PBMC模式， 适用于20ul, 100ul, 120ul, 200ul, 600ul和1ml电穿孔管。
Celetrix细胞电穿孔仪SLT, 货号：11-0104, 适用于200ul, 1ml, 5ml, and 10ml电穿孔管。
Celetrix带电融合功能升级款细胞电转仪EX+, 货号：11-0106F, 适用于20 ul, 100ul, 120ul, 200ul, 400ul, 600ul和1ml电穿孔管。型号EX+和型号SLT可以配备可选的融合配件，用于杂交瘤的产生。小鼠脾细胞可与SP2/0、P3X63Ag8等骨髓瘤细胞高效融合。
Celetrix特高压细胞电转仪 (Ultra High Voltage), 货号：11-0201, 细菌细胞:20ul, 100ul和600ul电穿孔管;酵母细胞:20 ul, 100ul, 200ul和1000ul电穿孔管。
Celetrix特高压细胞电转仪UHV-Plus, 货号：11-0202, 细菌细胞:20ul, 100ul和600ul电穿孔管;酵母细胞:20ul, 100ul, 200ul和1000 ul电穿孔管;哺乳动物细胞:20ul和200ul电穿孔管。