小鼠免疫细胞体内Depletion全攻略：GK1.5、2.43与PK136经典克隆号与选型指南

在小鼠肿瘤免疫、感染免疫、自身免疫病及自噬等研究中，体内免疫细胞清除实验（In Vivo Cell Depletion）是验证特定细胞亚群功能的“金标准”实验。通过特异性单克隆抗体靶向结合表面标记物，利用机体自身的免疫机制特异性耗竭目标细胞。

与通路阻断实验（Blocking）侧重于 Fc 静默（如 LALAPG 突变）不同，清除实验（Depletion）通常需要抗体具备强效的 FcγR 结合能力，以有效触发抗体依赖的细胞毒性（ADCC）或抗体依赖的细胞吞噬作用（ADCP）。本文为您整理常见小鼠免疫细胞清除的最佳靶点、经典克隆号、Syd Labs 重组抗体货号及推荐同型对照。

一、 免疫细胞清除机制与经典靶点对应清单

• CD4+ T 细胞清除：首选经典克隆号 GK1.5 (rIgG2b)，高度特异性地结合小鼠 CD4 分子，可实现高效的全身 CD4+ T 细胞耗竭。
• CD8+ T 细胞清除：首选克隆号 2.43 (rIgG2b) 或 YTS 169.4 (rIgG2b)，特异性识别小鼠 CD8a，用于评估 CD8+ CTL 在肿瘤杀伤或病毒清除中的作用。
• NK 细胞清除：首选克隆号 PK136 (mIgG2a)，针对 C57BL/6 或 NZB 等小鼠基因型中的 NK1.1 靶点（注：BALB/c 小鼠不表达 NK1.1，建议改用 anti-Asialo GM1）。
• 巨噬细胞 / 单核细胞清除：首选克隆号 AFS98 (rIgG2a)，靶向 CSF1R (CD115)，有效阻断 CSF-1 信号通路并阻断/清除单核巨噬细胞系。

二、 常见小鼠体内清除抗体与同型对照对照表

Syd Labs 采用 CHO 细胞高效重组表达平台，提供内毒素超低（<0.05 EU/mg）、无叠氮化钠的体内级重组单克隆抗体，并配套提供了相同分型与物种来源的同型对照（Isotype Control）：

三、 体内清除实验（Depletion Protocol）建议与操作要点

1. 体内注射剂量与给药途径：
   • 推荐剂量：通常为 100–250 μg/只 小鼠（或按 5–10 mg/kg 体重计算）。对于组织穿透难度较大的模型，首针可适当增加至 400–500 μg。
   • 给药途径：腹腔注射（i.p.）最常用且操作简便；尾静脉注射（i.v.）起效更快。
2. 给药频率与维护周期：
   • 在正式建立肿瘤或模型前 1–2 天（Day -2 或 Day -1） 进行首次腹腔注射，以确保造模时目标细胞已被清除。
   • 为维持长期的清除效果，建议每 3–4 天 补充注射一次（如每周两次，每次 100–200 μg）。
3. 流式细胞术（FACS）验证清除效率的时间点与技巧：
   • 验证时间：首次给药后 24–48 小时 取外周血（PBMC）或脾脏单细胞悬液进行流式分析，目标清除率一般应达到 95% 以上。
   • 流式荧光抗体选择（关键避坑点）：流式检测时，切勿使用与清除抗体相同克隆号的荧光抗体（例如使用了 GK1.5 清除抗体后，流式检测不可再用 GK1.5-FITC），否则会因为“表位表座（Epitope Masking）”发生竞争掩盖，导致假阴性。建议选择识别不同结合表位的流式克隆号（如用 RM4-4 或 RM4-5 验证 CD4 清除效果）。

需要了解更多抗体克隆号资料、验证流式染色荧光搭配方案，或需要批量订购高纯度 In Vivo 级抗体，请下载上方 PDF 选型指南或联系Syd Labs技术支持团队。