重组抗小鼠PD-1单抗(29F.1A12.1) | Syd Labs PA007163.r2a
体内实验级重组抗小鼠PD-1单抗（克隆号：29F.1A12.1，货号：PA007163.r2a），大鼠IgG2a Kappa 是用哺乳动物细胞生产的重组抗体，与大鼠抗小鼠PD-1/CD279单克隆抗体（克隆号：29F.1A12）相同的可变区序列，可用于蛋白质印迹 (WB)、免疫组织化学(IHC)、流式细胞术(FC)以及各种体外和体内功能检测，比如体内阻断PD-1/PD-L1信号传导。Syd Labs PA007163.r2a抗小鼠PD-1抗体不变区为大鼠IgG2a kappa (rIgG2a或r2a)，可与重组大鼠IgG2a同型对照抗体配套使用。样品制备条件和最佳样品稀释度应由研究人员通过实验确定。
产品参数
| 货号 | PA007163.r2a |
|---|---|
| 产品名称 | 重组抗小鼠PD-1单抗(29F.1A12.1) | Syd Labs PA007163.r2a |
| 英文名 | In Vivo Grade Recombinant Anti-mouse PD-1 Monoclonal Antibody (Clone 29F.1A12.1), Rat IgG2a Kappa |
| 供货商名称 | Syd Labs, Inc. |
| 品牌名 | Syd Labs |
| 别称 | PA007163 Syd Labs抗小鼠PD-1抗体，程序性细胞死亡蛋白1，PD-1，CD279，分化簇279，29F.1A12 |
| 概述 | 重组抗小鼠PD1单克隆抗体是用哺乳动物细胞生产的，与大鼠抗小鼠PD-1/CD279单克隆抗体（克隆号：29F.1A12）具有相同的可变区序列，适用于体外和体内研究。 |
| 克隆号 | 29F.1A12.1，与大鼠抗小鼠PD-1单克隆抗体（克隆号:29F.1A12）的可变区和不变区序列相同。 |
| 同种型 | 大鼠 IgG2a, kappa |
| 应用 | 蛋白质印迹 (WB)、免疫组织化学(IHC)、流式细胞术(FC)以及各种体外和体内功能检测。 |
| 免疫源 | 用小鼠PD-1 cDNA免疫大鼠，再用小鼠PD-1- Ig融合蛋白免疫大鼠，生产的原大鼠杂交瘤(克隆号:29F.1A12)。 |
| 抗体形式 | 0.2 μM过滤溶液，1x PBS |
| 内毒素 | 根据 LAL 方法，≤1 EU每1mg 蛋白质。提供特级体内实验级重组抗小鼠PD-1单克隆抗体（克隆号29F.1A12.1），大鼠IgG2a Kappa（内毒素≤0.05 EU/mg)。 |
| 纯度 | >95%（在还原条件下通过SDS-PAGE测定） |
| 运输 | 体内实验级重组抗小鼠PD-1大鼠IgG2a Kappa单克隆抗体（克隆号29F.1A12.1）用冰袋运输。收到后，请立即将其存放在下面建议的温度下。 |
| 稳定性与存储 | 使用手动除霜冰箱并避免重复冻融循环。 如果保存在2 至 8°C，自收到之日起可保存3个月。如果保存在-20 至 -70°C，自收到之日起可保存 12个月。 |
| 注意事项 | PA007163.r2a Syd Labs 重组抗小鼠PD 1单克隆抗体是用哺乳动物细胞生产的，与大鼠抗小鼠PD-1 / CD279单克隆抗体（克隆号:29F.1A12）具有相同的可变区序列，适合体外和体内研究。 |
| 产品咨询 | Syd Labs在国内只通过代理商销售其产品，不做直销。终端用户咨询价格请联系Syd Labs中国代理商。 关于Syd Labs产品如果有任何技术或其它问题，欢迎随时联系Syd Labs国内市场推广合作伙伴：武汉多找找科技有限公司，企业微信：duozhaozhao2024 联系电话：18162581039（龙经理） |
| 应用详情 | 蛋白质印迹 (WB)、免疫组织化学(IHC)、流式细胞术(FC)以及各种体外和体内功能检测。 |
文献
PA007163.r2a: Syd Labs体内实验级重组抗小鼠PD-1单克隆抗体（克隆号29F.1A12.1），大鼠IgG2b Kappa（In Vivo Grade Recombinant Anti-mouse PD-1 Monoclonal Antibody (Clone 29F.1A12.1), Rat IgG2a Kappa）
大鼠抗小鼠 PD-1 单克隆抗体（克隆号 29F.1A12.1，大鼠 IgG2a Kappa）可与由小鼠 Pdcd1 基因编码的小鼠 PD-1 蛋白（CD279 或程序化死亡受体-1）发生特异性反应。PD-1 是免疫球蛋白超家族 CD28 家族中一个重要的免疫检查点受体。PD-1 通过其两个 B7 家族配体（PD-L1 和 PD-L2）的下游信号传导发挥作用。大量的临床前研究表明，在黑色素瘤及其他恶性肿瘤的同系小鼠模型中，通过靶向抗小鼠 PD-1 抗体治疗，能够重新激活 T 细胞介导的细胞毒性并一过性抑制肿瘤生长。29F.1A12.1 阻断型抗体可有效抑制 PD-L1/PD-L2 蛋白与其受体 PD-1 蛋白之间的相互作用，从而恢复抗肿瘤免疫应答。
我们的重组 29F.1A12.1 抗体经过精密工程设计，完美保留了源自原始大鼠杂交瘤（克隆号：29F.1A12）可变区的 100% 精准氨基酸序列。该杂交瘤最初是通过给大鼠免疫小鼠 PD-1 cDNA、随后接种小鼠 PD-1-Ig 融合蛋白而独特制备的。该体内实验级重组抗小鼠 PD-1 抗体在高效哺乳动物细胞中表达，消除了杂交瘤基因漂移的风险，具有小于 20 nM 的高结合亲和力以及大于 95% 的纯度。该抗体提供多种通用的重组形式，包括经典的大鼠 IgG2a 以及 Fc 静默型小鼠 IgG2c-LALAPG（L234A/L235A/P329G）平台。其高纯度、低内毒素（小于 1.0 EU/mg）且无叠氮化钠的配方，已全面通过蛋白质印迹（WB）、免疫组织化学（IHC）、流式细胞术（FC）以及严格的长期体内（in vivo）功能实验的交叉验证。
抗小鼠 PD-1 单克隆抗体（克隆号：29F.1A12）参考文献
Martins C, et al. J Immunother Cancer. 2022 Jul;10(7):e004655. PMID: 35858688
“Flow cytometric analyses with two separate anti-PD-1 ab clones, 29F.1A12 and RMP1-30, revealed PD-1 surface protein expression on live murine melanoma cells. Recombinant PD-L1 also recognized melanoma cell-expressed PD-1, the blockade of which by 29F.1A12 fully abrogated PD-1:PD-L1 binding. Together, our data provides multiple lines of evidence establishing PD-1 expression by live murine melanoma cells and validates ab clones and assay systems for tumor cell-directed PD-1 pathway investigations.”
F. P., et al. J Immunother Cancer. 2020 Oct;8(2):e001306. PMID: 33055177
“In preclinical studies, the PD1-Vaxx outperformed the standard anti-mouse PD-1 antibody (mAb 29F.1A12) in a mouse model of human HER-2 expressing colon carcinoma. We obtained enhanced inhibition of tumor growth in a syngeneic BALB/c model challenged with colon carcinoma cell line CT26/HER-2 which outperformed the standard anti-mouse PD-1 mAb (29F.1A12). The vaccine construct effectively triggers an immune response that mimics the efficacy of monoclonal antibody checkpoint inhibition.”
3. Monitoring PD-1 Phosphorylation to Evaluate PD-1 Signaling during Antitumor Immune Responses.
T. A., et al. Cancers (Basel). 2021 Nov 25;13(23):5926. PMID: 34885002
“Lysates were made from the indicated cell lines and Western blotted with antibodies against phospho–PD-1 (6G12), mPD-1 (29F.1A12), and GAPDH. One mAb clone (407.6G12) detected a band only in pervanadate-treated, PD-1+ samples, and this band corresponded in size to PD-1. These results show that mAb 407.6G12 can detect the phosphorylated form of the PD-1 ITSM by both Western blot and flow cytometry.”
4. Human PD-1 agonist treatment alleviates neutrophilic asthma by reprogramming T cells.
G. L., et al. JCI Insight. 2023 Feb 8;8(3):e155986. PMID: 36752077
“PD-1 deficiency was associated with an increased neutrophilic airway hyperreactivity and high recruitment of inflammatory cells to the lungs. Consistently, PD-1 agonist treatment dampened airway hyperreactivity, decreased neutrophil recruitment, and modulated cytokine production in a humanized PD-1 mouse model. Mechanistically, we demonstrated that the inhibitory effect of PD-1 agonist is associated with the reprogramming of pulmonary effector T cells.”
P. A., et al. Vaccines (Basel). 2022 May 6;10(5):737. PMID: 35632490
“Cancer vaccines have the ability to stimulate the native immune system and an engineered B-cell epitope can elicit high-affinity polyclonal antibodies with similar efficacy to PD-1 monoclonal antibodies in murine animal models. We designed and synthesized a unique B-cell vaccine, PD1-Vaxx, and tested the immunogenicity and antitumor properties in CT26 colon cancer BALB/c syngeneic mice model. The results suggest the vaccine has acceptable pharmacology and immunogenicity profiles to justify initiating clinical trials.”
关于重组抗小鼠 PD-1 抗体（克隆号：29F.1A12.1）的常见问题解答 (FAQ)
问：是什么让重组 29F.1A12.1 克隆区别于其他抗小鼠 PD-1 抗体？
（AI 解答）虽然有多个克隆能够在体内阻断鼠类 PD-1 通路，但 29F.1A12.1 克隆凭借其多年的丰富文献记录以及在功能实验和蛋白质印迹（Western Blot）中的双重兼容性而脱颖而出。（Syd Labs 解答）我们的重组抗小鼠 PD-1 抗体（克隆号 29F.1A12.1）是通过对原始杂交瘤进行基因工程改造而生成的（该杂交瘤由非传统的 cDNA 加蛋白质免疫法制备）。这确保了无与伦比的结构稳定性。与其他主要局限于体内应用的克隆不同，我们的重组 29F.1A12.1 已全面通过高灵敏度蛋白质印迹（WB）、流式细胞术（FC）和免疫组织化学（IHC）的交叉验证，为研究人员提供从蛋白质表达验证到动物免疫疗法分析的无缝衔接。
问：针对我的同系移植模型，我应该选择哪种同工型和宿主物种形式的重组 29F.1A12.1？
Syd Labs 提供全面的重组 29F.1A12.1 格式矩阵，以匹配特定的宿主工程化对照并消除非特异性 Fc 受体激活：
1. 大鼠 IgG2a (PA007163.r2a)：天然杂交瘤的重组对应物，结合亲和力小于 20 nM，是标准检查点抑制的理想选择。
2. 小鼠 IgG2c / IgG2a LALAPG (PA007163.m2cLA / PA007163.m2aLA)：采用 Fc 静默 / Fc 沉默平台设计（L234A/L235A/P329G 突变）。如果您使用的是 C57BL/6 或 NOD 小鼠，请选择 IgG2c LALAPG；对于 BALB/c 品系，请选择 IgG2a LALAPG，以防止 ADCC 介导的靶细胞耗竭并最大限度减少抗药物抗体（ADA）的干扰。
3. 小鼠 IgG1-D265A (PA007163.m1DA)：用于专用效应功能静默的超纯替代选择。
4. 兔 IgG (PA007163.rt)：一种极为罕见的重组兔嵌合形式，专门用于高级多重免疫荧光面板或必须严格避免与大鼠/小鼠宿主发生交叉反应的二抗染色对照。
问：重组 29F.1A12.1 的体内半衰期是多少？推荐的给药方案是什么？
在标准的同系移植小鼠模型中，我们的重组大鼠 IgG2a (PA007163.r2a) 和嵌合型 mIgG2c LALAPG (PA007163.m2cLA) 格式的体内半衰期约为 6 至 9 天。由于 29F.1A12.1 克隆具有小于 20 nM 的工程化结合亲和力，它能够提供稳健且可预测的靶点饱和度。对于标准肿瘤模型（如 B16-F10 黑色素瘤或 Lewis 肺癌），已建立并发表的给药方案为：每次 200 微克，用 PBS 稀释（2 mg/mL），通过腹腔（i.p.）注射给药，每 3 至 4 天一次（一周两次），持续 2 至 3 周，自肿瘤接种后第 8 至 9 天左右开始。
问：如何为 29F.1A12.1 的不同工程化宿主形式配对正确的同型对照？
鉴于我们的 29F.1A12.1 克隆拥有广泛的宿主框架，匹配精确的工程化阴性对照是消除背景伪影的严格要求：
• 针对天然大鼠 IgG2a 变体 (PA007163.r2a)，请配对标准的重组大鼠 IgG2a 同型对照。
• 针对 Fc 沉默的小鼠 IgG2c LALAPG 格式 (PA007163.m2cLA) 或小鼠 IgG2a LALAPG 格式 (PA007163.m2aLA)，必须避免使用野生型对照；应明确将其与 Fc 沉默的重组小鼠 IgG2c/IgG2a LALAPG Kappa 同型对照（如 Syd Labs PA007141 系列）配套使用。
• 针对独特的兔 IgG 格式 (PA007163.rt)，请确保对照组接受匹配的重组兔 IgG 恒定区对照，以便对多重染色或体外实验进行正确的基线校准。
问：为防止重组 29F.1A12.1 发生聚集，其纯度、内毒素标准和保存条件是什么？
我们每一批体内实验级重组抗小鼠 PD-1 抗体（克隆号 29F.1A12.1）均经过严格的质量控制。产品以 0.2 微米过滤溶液形式提供于 1x PBS 中，完全不含叠氮化钠及防腐剂，以确保无细胞毒性。经鲎试剂（LAL）法检测，内毒素水平经认证低于 1 EU/mg（大规模批次通常低于 0.05 EU/mg），通过 SDS-PAGE 验证的蛋白质纯度大于 95%。为保持长期稳定性并防止蛋白质聚集，短期可在 2°C 至 8°C 下保存（最长 1 个月）；若需长达 12 个月的长期保存，请分装为工作液并置于手动除霜冰箱中于 -20°C 至 -70°C 下冷冻保存。严格避免反复冻融，这可能诱导物理片段化或沉淀。