结直肠癌小鼠模型选型指南：MC38与CT26区别、恒定区选择及抗体应用
在小鼠肿瘤免疫及临床前药效评估中，结直肠癌小鼠模型应用极其广泛。其中，MC38 与 CT26 是最为经典的两类同源肿瘤模型。然而，尽管两者同属结直肠癌，但在宿主品系背景、IgG 恒定区亚型匹配以及对不同检查点抑制剂的响应机制上存在显著差异。
本文基于既有文献数据汇编，系统整理了 MC38 与 CT26 模型的使用差异、体内功能抗体选型逻辑及实验中容易忽视的技术避坑指南。
一、 结直肠癌小鼠模型一句话快速选型
- 验证检查点抗体基础活性：优先考虑 MC38（对单药阻断部分敏感，效应易于重复检出）。
- 评估联合给药方案的增益：MC38 或 CT26 均可（两者均属部分敏感，留有疗效增益观察窗口）。
- 必须依赖 BALB/c 背景：选择 CT26（与 BALB/c 背景试剂或腹腔播散模型配套）。
- 研究肿瘤腹膜转移：选择 CT26 腹腔播散模型。
- 需要靶点人源化背景：优先选择 MC38（具备 MC38-hPD-L1、MC38-hPVR 等丰富衍生株及配套 Knock-in 小鼠）。
二、 MC38 与 CT26 模型核心参数选型对比
在进行抗体跨模型复用或对比实验时，首先需要厘清两个模型在遗传背景与表达特征上的本质差异：
| 对比维度 | MC38 模型 | CT26 模型 |
|---|---|---|
| 模型来源 | 化学致癌物诱导的小鼠结肠腺癌 | N-亚硝基-N-甲基氨基甲酸乙酯诱导的结肠癌 |
| 小鼠品系背景 | C57BL/6 | BALB/c |
| Igh 单倍型与表达 | Igh1-b（IgG2a 基因缺失，表达 IgG2c） | Igh1-a（IgG2c 基因缺失，表达 IgG2a） |
| 推荐同源恒定区 | Mouse IgG2c | Mouse IgG2a |
| 突变负荷与敏感性 | 高突变负荷；对 PD-1 阻断单药部分敏感 | 高突变负荷；对 PD-1 阻断单药部分敏感 |
| 常见接种方式 | 皮下接种为主，亦有原位接种 | 皮下、皮内及腹腔播散接种 |
| 常见衍生株 | MC38-OVA、MC38/hPD-L1、MC38-hPVR 等 | CT26.WT 等 |
（提示：支持左右滑动查看完整表格数据）
核心避坑点 1：同种异体（Allotype）恒定区不匹配
C57BL/6 携带 Igh1-b 等位基因，体内不表达天然 IgG2a 而表达 IgG2c；BALB/c 携带 Igh1-a，情况刚好相反。两者的氨基酸序列差异约 16%（Martin RM 等, J Immunol Methods. 1998）。从 MC38 实验直接沿用同一支重组抗体到 CT26，会引入同种异体不匹配，在多次给药时易产生抗药抗体（ADA）及免疫原性干扰。
核心避坑点 2：NK 细胞清除抗体不通用
常用抗体 PK136（抗 NK1.1）依赖 NK1.1 等位基因，仅适用于 C57BL/6（MC38）；在 CT26 所属的 BALB/c 背景中，必须改用 TM-β1（抗 CD122）或抗 asialo GM1。将 MC38 的清除方案直接照搬至 CT26 会导致细胞清除失效。
三、 常用体内功能抗体选型总览
在结直肠癌小鼠模型中，不同靶点所采用的重组单克隆抗体克隆号与应用场景如下表所示：
| 机制类别 | 作用靶点 | 代表克隆号与站内产品链接 | MC38 应用 | CT26 应用 |
|---|---|---|---|---|
| 检查点阻断 | PD-1 | RMP1-14 / 29F.1A12 / J43 |
适用（RMP1-14 / J43） | 适用（RMP1-14 / 29F.1A12） |
| PD-L1 | 10F.9G2 / MIH5 / 23A11 |
适用（MIH5） | 适用（10F.9G2） | |
| CTLA-4 | 9D9 / 4F10 | 适用（9D9） | 适用（4F10） | |
| TIM-3 / TIGIT | RMT3-23 / 1F4 (TIGIT) / 90D9 |
适用（TIGIT 双抗） | 适用（RMT3-23） | |
| 细胞清除/机制 | CD8α / CD4 / CD25 | 2.43 (CD8a) / GK1.5 / PC61 |
广泛应用（耗竭实验） | 需注意亚型与匹配 |
| NK 细胞清除 | PK136 vs TM-β1 | PK136（NK1.1） | TM-β1 或 asialo GM1 | |
| 血管生成抑制 | VEGFR-2 / VEGF | DC101 / B20-4.1.1 |
适用（DC101 / 双抗） | 适用（DC101 / B20-4.1.1） |
四、 Fc 效应功能方向：靶点决定骨架选择
在同一个结直肠癌模型中，不同靶点对抗体 Fc 域效应功能（ADCC/ADCP/CDC 或 FcγR 交联）的需求截然不同：
- PD-1 靶点（效应功能有害）：抗 PD-1 的体内活性不依赖 FcγR。具有强 FcγR 结合能力的骨架可能导致 ADCC 清除 PD-1⁺ 效应 T 细胞。因此，推荐使用 LALAPG 等 Fc 沉默静默骨架。
- PD-L1 / CTLA-4 靶点（效应功能有益）：疗效部分依赖 ADCC/ADCP 清除肿瘤微环境中的 PD-L1⁺ 髓系细胞或 Treg 细胞（例如 9D9 克隆采用 mIgG2a 骨架的抑瘤效果显著强于 mIgG2b 版本）。
- 激动型靶点（如 OX40、4-1BB，依赖交联）：其激动活性高度依赖 FcγRIIB 介导的受体交联。若换用 LALAPG 等效应沉默骨架，会因失去交联能力而导致激动活性丧失。
五、 实验设计与结论推导的注意事项
- 单药效果弱不等于方案无效：在 MC38 模型中，部分检查点抗体单药治疗仅表现出微弱活性，但双靶点联合给药时可使大部分成瘤小鼠实现肿瘤消退。
- 跨模型结论不可简单外推：PD-1 与 LAG-3 共阻断在免疫原性较高的 MC38 模型中抑瘤效果显著，但在低免疫原性的 B16F10 模型中响应有限。模型本身的免疫微环境决定了组合疗法的响应上限。
- 引用文献剂量需核对造模条件与 Fc 骨架：文献中的给药剂量不能脱离接种细胞量（2×10⁵ 至 5×10⁶ 跨度较大）、入组瘤体积及抗体的具体 Fc 亚型。换用重组改造形式后，剂量须重新进行预实验探索。
六、 参考文献
[1] Martin RM, et al. The need for IgG2c specific antiserum when isotyping antibodies from C57BL/6 and NOD mice. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID: 9672206.
[2] Dahan R, et al. FcγRs modulate the anti-tumor activity of antibodies targeting the PD-1/PD-L1 axis. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID: 26373277.
[3] Preclinical development of ipilimumab and nivolumab combination immunotherapy. PLOS One. 2016;11(9):e0161779. PMID: 27658097.
特别声明：本文总结的选型指南基于公开学术文献编纂，仅供科研人员在小鼠模型实验设计中作为技术参考，涉及的所有抗体试剂仅限于科研使用。