SB28胶质瘤模型中的体内功能抗体

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检索截止 2026-10-26

1. SB28胶质瘤模型模型概述：为“最像人 GBM”而生的抗性模型

SB28 是用 Sleeping Beauty 转座子构建的 C57BL/6 胶质瘤模型：将靶向 P53、RAS 与 PDGF 通路的构建体（pT2/CAG-NRasV12 与 pT2/shp53/mPDGF）注入 C57BL/6 小鼠脑室而成。它与 GL261 的关系，是本站继 LLC/CMT167 之后第二组“同疾病、抗性 vs 敏感”的配对——但立论方向恰好相反。

为什么会有 SB28：GL261 其实不像人 GBM
GL261 是使用最广的免疫健全 GBM 模型，但它有一个长期被忽视的问题：突变负荷太高。

GL261 的高突变负荷会产生可被 T 细胞识别的新表位，由此带来的强 T 细胞浸润在人 GBM 中通常观察不到。换句话说，GL261 对免疫治疗的敏感性，可能部分来自一个人 GBM 并不具备的特征。

SB28 正是为弥补这一点而建立：低突变负荷、低 MHC-I、稀疏 T 细胞浸润，肿瘤侵袭正常脑实质。体内传代后重测序显示 SB28 会获得新的突变，但突变负荷仍然维持在低位，与人 GBM 相当。

核心效应量：一个全有、一个全无
基于抗 PD-1 与抗 CTLA-4 双重阻断的免疫治疗方案，在 GL261 荷瘤小鼠中治愈率超过 50%，而在 SB28 中完全无效。

• 选型含义（与 LLC/CMT167 那一组对照着看）：肺癌那一组是“常用模型耐药、配对模型敏感”——CMT167 提供了一个能出阳性结果的对照。胶质瘤这一组是“常用模型敏感、配对模型耐药”——而且耐药的那个更像人的疾病。

这意味着 GL261 上的阳性结果，需要在 SB28 上再验一次才可靠。 SB28 被作者描述为“高度严苛（highly stringent）”的模型，用于优化免疫治疗方案。
品系与恒定区： C57BL/6 背景（Igh1-b 等位），同源恒定区为 IgG2c，与 GL261、MC38、B16、LLC、CMT167 一致。

2. SB28胶质瘤模型中使用的体内功能抗体

本页最主要的缺口： 核心文献在可检索片段中仅表述为“接受腹腔注射抗 PD-1 与抗 CTLA-4 抗体或同型对照，按指定剂量与时间点”，具体数值与克隆号须调阅全文补入。这是本页的首要工作。 可参照的旁证：同一课题组在 GL261 中的常见用法为抗 PD-1 200–250 µg/只、抗 CTLA-4 100 µg/只（见 GL261 页），但不可默认 SB28 沿用同一方案。

体外表征所用抗体（非体内给药，供实验设计参考）：
流式表面染色所用：抗 MHC-I（H-2Db）生物素标记，克隆 KH95；抗 FAS（CD95），均购自 BD Pharmingen。染色前部分条件用 干扰素-γ 100 U/mL 处理 48 小时。

这套体外表征值得借用为选型的前置步骤： 用干扰素-γ 处理后看 MHC-I 与 PD-L1 是否上调，可在动物实验之前对细胞系的免疫治疗敏感性做初步预判。CMT167 页也记录了类似做法（干扰素-γ 诱导 PD-L1 上调与体内敏感性相关）。

3. 造模条件

接种量只有 1,600 个细胞——这是本站全部十二个模型中最低的接种量，比 GL261 常用的 5×10⁴–1×10⁵ 低一到两个数量级。SB28 的成瘤性极强，接种量按皮下模型的习惯放大会导致动物过早死亡。跨模型照搬接种量在这里是危险的。

细胞培养：DMEM（4.5 g/L 葡萄糖）+ 10% FCS；用 accutase（而非胰酶）消化；文献明确报告细胞系支原体检测阴性。
报告支原体检测状态的来源在本站并不多见，这是本文献的一个规范之处。

4. 读数与终点

• 无症状生存期（symptom-free survival） 为主要读数——与 GL261 页一致，原位胶质瘤模型不用瘤体积。
• 免疫组化用于评估肿瘤对正常脑实质的侵袭与 T 细胞浸润密度。
• 流式用于 MHC-I、FAS、PD-L1 等表面分子表达。
• 全外显子测序与 RNA 测序用于突变负荷评估。

5. 本模型特有的注意事项

1. 接种量极低（1,600 细胞）（§3），不可按其他模型的习惯放大。
2. 恒定区为 IgG2c（C57BL/6 背景）。
3. 本模型对检查点阻断完全耐药——阴性结果是预期，不能用它验证抗体活性；它的用途是“严苛筛选”，即看某个新方案能否在最不利的条件下起效。
4. 与 GL261 配对使用时，两者的接种量、成瘤动力学与免疫表型都不同，实验条件须分别优化，不能共用一套。
5. 读数是生存期而非瘤体积，统计方法与样本量估算随之不同。
6. 体内传代会引入新突变，但负荷仍维持低位（§1）；长期传代的细胞库仍建议定期重测序。
7. 血脑屏障：抗体在脑内的暴露量与外周不同，外周 PK 数据不可外推。本模型未见脑内暴露量测定记录。

6. 证据缺口

• 具体给药剂量、频次与克隆号未检索到，是本页首要补检内容（须调阅 Oncoimmunology. 2018;7(12):1501137 全文）。
• 本模型总体文献量远少于 GL261，独立证据基础薄；目前价值主要体现在与 GL261 的配对比较中。
• 未见共刺激激动型抗体、清除类抗体在本模型中的使用记录。
• 未见靶点结合确认或脑内暴露量测定。
• 未见效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2c LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据。
• 一处需注意的原文表述： 有综述在描述 SB28 建立过程时把品系写作 “C57L/6”，按上下文应为 C57BL/6。二手引用时留意此类笔误。

7. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2c（C57BL/6 背景）。重组小鼠化抗体应优先选用该恒定区；从 BALB/c 系模型沿用抗体会引入同种异体不匹配。

8. 参考文献

1. Responsiveness to anti-PD-1 and anti-CTLA-4 immune checkpoint blockade in SB28 and GL261 mouse glioma models. Oncoimmunology. 2018;7(12):1501137. PMID 30524896. doi:10.1080/2162402X.2018.1501137.（本模型核心文献）
2. Pre-clinical models for evaluating glioma targeted immunotherapies. Front Immunol. 2022;13:1092399.（突变负荷比较与 SB28 构建方式）
3. Anti-PD-1 checkpoint blockade monotherapy in the orthotopic GL261 glioma model: the devil is in the detail. Neuro-Oncology Advances. 2021;3(1):vdab066. PMID 34151268.（GL261 结论不一致的系统梳理，配对阅读）
4. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
5. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
6. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.