E0771乳腺癌模型中的体内功能抗体

检索截止 2026-10-26

1. E0771乳腺癌模型概述：本库唯一自带“应答者／非应答者”分层的模型

E0771 于 1955 年从 C57BL/6 背景小鼠自发的乳腺腺癌中建立，是三阴性乳腺癌（TNBC）最常用的 C57BL/6 同源模型。有综述载明：该模型经抗 PD-1 治疗后出现部分肿瘤消退。

它在本库十五个模型中的独特之处，是应答的异质性本身可重复。

有研究在原位 E0771 模型中报告：大多数小鼠对抗 PD-1 治疗产生应答并出现肿瘤缓解，但其中稳定地有约 30%–40% 的小鼠不应答。 关键在于——这些小鼠自出生起即共同饲养于该实验室的限定菌群动物设施中，从而排除了宿主菌群差异作为应答差异的原因。

应答呈双峰分布：应答组在治疗开始后约 7 天肿瘤负荷急剧下降，非应答组的生长速率与 IgG 对照组相当；两组的生长曲线自 D15 起开始分离。

其他模型的“部分应答”通常被当作噪声处理；E0771 的应答分层是可重复、且已排除菌群因素的。 这使它成为研究“为什么同一批小鼠里有的响应、有的不响应”的现成工具——这正是临床上最核心的问题，而本库其他模型（要么整体敏感如 MC38，要么整体抗性如 B16、LLC、SB28、YUMM）都回答不了。

1.1 一个利用该特性的巧妙设计：双侧接种

有研究据此建立双侧原位模型：在同一只小鼠的左右乳腺脂肪垫接种相同数量的 E0771 细胞。其用意是——取一侧肿瘤用于治疗启动前或启动后短期内的微环境分析，同时保留另一侧用于判定该小鼠最终是应答者还是非应答者。

这解决了一个常规设计无法解决的矛盾：想在治疗早期取材做机制分析，就失去了该动物的最终应答判定。 双侧接种让同一只动物既提供早期分子数据、又提供最终表型标签。

注意与 EMT6 的双侧接种区分： EMT6 的双侧设计用于测远隔效应（一侧给药、对侧不给）；E0771 这里的双侧是用于配对取材与应答判定。两者目的完全不同。

1.2 同品系内还有一个抗性对照模型：AT-3

有研究把 E0771 与 AT-3 在同一实验中平行比较（同为 C57BL/6 原位乳腺模型，同法接种、同法给药）：E0771 肿瘤对抗 PD-1 应答，AT-3 肿瘤不应答。

这构成本库第四组“同疾病、抗性 vs 敏感”配对（前三组：肺癌 LLC/CMT167、胶质瘤 GL261/SB28、黑色素瘤 B16/YUMM）。而且这一组的两个模型同品系、同部位、同接种方式，可比性优于前三组。 另有研究报告从 C57BL/6J MMTV-Cre Trp53fl/+ 小鼠自发肿瘤衍生的 MM001i 与 MM008i 两株，同样呈现对抗 PD-1 的差异应答（前者弱应答、后者强应答至近乎完全缓解）——C57BL/6 乳腺癌方向的模型选择正在变多。

品系与恒定区： C57BL/6（多为 C57BL/6J）背景，同源恒定区为 IgG2c。
⚠ 这一条对乳腺癌这条线是分岔点：4T1 与 EMT6 是 BALB/c（IgG2a），E0771 是 C57BL/6（IgG2c）。 把抗体从 4T1/EMT6 直接搬到 E0771，同种异体就翻转了——与结直肠癌的 MC38/CT26 情形相同。

2. E0771乳腺癌模型中使用的体内功能抗体

2.1 免疫检查点

一组值得引用的效应量： 有研究报告在 E0771 中，抗 PD-1 与抗 CTLA-4 单药仅产生中等程度的抗肿瘤效应，而两者联合产生显著应答，80% 的小鼠肿瘤完全消退；该方案在 4T1、JC 以及 MMTV-PyMT 自发肿瘤中同样高效。这是本库乳腺癌方向最高的完全消退率记录。

2.2 髓系靶点

该研究设了一个本库少见的“药效动力学臂”： 在三个时间点（首剂后 2 天、首剂后 5 天、第二剂后 24 小时）各处死 15 只/组，采集肿瘤、脾与血。多数研究只在终点取材，因而无法区分“早期机制”与“晚期结果”。

3. E0771乳腺癌模型造模条件汇总

四点要注意：
• 接种量跨越 1×10⁵ 至 1×10⁶，相差一个数量级。
• 有研究共接种小鼠乳腺成纤维细胞（5×10⁵ 肿瘤细胞 + 1×10⁵ 成纤维细胞），构成“肿瘤 + 基质”共接种模型，与单纯肿瘤细胞接种的微环境不同。
• 有研究同时使用雄性与雌性小鼠（US10842763）。乳腺肿瘤模型使用雄鼠并不常见，引用该类数据时须确认性别，并考虑其对乳腺微环境与激素背景的影响。
• 细胞传代限制有报告： US10842763 明确写明“细胞使用前传代不超过 3 周”，并定期用 MycoAlert 确认无支原体。本库中报告传代与支原体状态的来源不超过三条。

4. 读数与终点

• 瘤体积公式至少两种：(π×长×宽²)/6（Front Immunol. 2020）与 [长×宽²]/2（US11572407）。数值不可跨文献直接比较。
• 终点：1500 mm³（Front Immunol. 2020）；其余未统一报告。
• 应答者／非应答者分层是本模型特有的读数（§1）。
• 双侧模型：一侧取材做微环境分析、对侧随访判定应答（§1.1）。
• 手术+继发瘤设计：考察术前用药对二次肿瘤的持续免疫效应（Front Immunol. 2020）。

5. 对照与样本量

本模型的对照记录整体优于本库平均水平——五条来源中四条设了亚型匹配的同型对照抗体，无一以生理盐水替代。这与本库累计记录到的五个模型（MC38、4T1、RENCA、LLC、A20）中的盐水对照做法形成对比。
样本量也偏大（n=15 出现两次），这与应答分层的统计需要一致——要检出 30%–40% 非应答者的比例差异，小样本量不够。

6. 本模型特有的注意事项

1. 恒定区为 IgG2c（C57BL/6 背景）。不要从 4T1 或 EMT6（BALB/c，IgG2a）沿用抗体（§1）。
2. 约 30%–40% 的小鼠不应答，且已排除菌群因素（§1）——设计样本量时须按分层比例估算，不能按均值。
3. 双侧接种在本模型中的用途是配对取材，不是远隔效应（§1.1）——与 EMT6 区分。
4. AT-3 是同品系、同部位的抗性对照模型（§1.2）。
5. 有共接种成纤维细胞的用法，微环境与单纯接种不同（§3）。
6. 有研究使用雄性小鼠，引用前确认性别（§3）。
7. 瘤体积公式至少两种（§4）。
8. 接种量跨一个数量级（§3）。

7. 证据缺口

• 抗 PD-1 的具体克隆号多数未注明（一条标为“BioXCell, CD279”，未给克隆名与货号）。
• 抗 CTLA-4 的具体克隆与剂量未检索到，尽管 PD-1 + CTLA-4 联合是本模型效应量最高的方案（80% 完全消退）。
• 未检索到清除类抗体（抗 CD8、抗 CD4、抗 NK）在本模型中的具体剂量。
• AT-3 模型的独立记录很少，目前仅见于与 E0771 的平行比较。
• E0771.LMB（自发转移变体）未检索到抗体给药记录。
• 未见靶点结合确认或暴露量测定。
• 未见效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2c LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据。

8. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2c（C57BL/6 背景）。注意本疾病下的 4T1 与 EMT6 为 BALB/c（IgG2a），抗体不可直接复用。

9. 参考文献

1. Evaluating immunotherapeutic outcomes in triple-negative breast cancer with a cholesterol radiotracer in mice. JCI Insight. 2024. doi:10.1172/jci.insight.175320.（E0771 与 AT-3 的平行比较；作者待补）
2. A bilateral tumor model identifies transcriptional programs associated with patient response to immune checkpoint blockade. PNAS. 2020. doi:10.1073/pnas.2002806117.（应答分层与双侧设计；作者待补）
3. NF-κB associated markers of prognosis in early and metastatic triple negative breast cancer. Breast Cancer Res. 2024. doi:10.1186/s13058-024-01925-3.（29F.1A12、C9B7W、RMT3-23 各 200 µg）
4. NKG2A is a therapeutic vulnerability in immunotherapy resistant MHC-I heterogeneous triple-negative breast cancer. PMC10850946.（20D5 的负荷+维持方案；同时覆盖 EMT6）
5. Therapy with carboplatin and anti-PD-1 antibodies before surgery demonstrates sustainable anti-tumor effects for secondary cancers in mice with triple-negative breast cancer. Front Immunol. 2020;11:366.（手术+继发瘤设计；同时覆盖 4T1 与 EMT6）
6. Murine models for triple-negative breast cancer with differential responsiveness to immunotherapy. PMC12919076.（E0771 的来源与 MM001i / MM008i）
7. Johnstone CN, et al. Functional and molecular characterisation of E0771.LMB tumours, a new C57BL/6-mouse-derived model of spontaneously metastatic mammary cancer. Dis Model Mech. 2015;8:237-51. doi:10.1242/dmm.017830.
8. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
9. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
10. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
11. 专利出处：US11572407（MARCO）、US10842763 / US11759444（谷氨酰胺拮抗剂前药，含传代与支原体报告）。