GL261原位胶质瘤模型中的抗PD-1（RMP1-14）应用

检索截止 2026-10-26

1. GL261原位胶质瘤模型概述：本模型的结论在文献间高度不一致

GL261 是 C57BL/6 背景的小鼠胶质瘤细胞系，立体定向接种至脑内构成原位模型。与皮下模型不同，读数为生存期而非瘤体积。

有一篇专门梳理该问题的综述（Neuro-Oncology Advances 2021;3(1):vdab066，PMID 34151268）系统检视了 16 项在原位 GL261 中做抗 PD-1 单药阻断的研究，结论是：即便是该模型中常见的免疫治疗干预，其疗效仍不明确，文献中的结论差异极大。

该综述按证据强度对影响生存期的变量做了分级，其中有直接证据证明会调节抗 PD-1 治疗下 GL261 荷瘤小鼠生存期的因素有两个：治疗开始时的肿瘤大小，以及抗体给药剂量。 另有一批变量已知会影响 GL261 荷瘤动物的生存期，推测在抗 PD-1 单药背景下同样成立。该综述并指出，克隆差异（J43、RMP1-14、RMP1-30）、给药时机、给药途径，以及接种操作本身的多种变量，都是结论不一致的可能成因。

对使用者的实际含义：本模型不宜照搬任何单篇文献的给药方案。 建议先读该综述的变量分级表，确定自己实验中哪些变量需要控制，再决定条件。本文档下表仅供了解文献中实际用过哪些条件，不构成方案推荐。

一个方法学细节值得借用： 该综述在横向比较时，把按只给药（µg）的剂量统一按 20 g 体重折算为 mg/kg。这与本汇编 §3 的换算提示一致；引用跨单位数据时应注明所假设的体重。

该综述还记录了一处文献错误： 有原始论文把所用克隆写作 “RPMI-14”，因查无此克隆，综述作者推定作者本意为 “RMP1-14”。引用二手数据时值得留意此类笔误。

2. GL261原位胶质瘤模型中使用的体内功能抗体

2.1 免疫检查点

Clin Cancer Res 2017 的八臂设计是本模型最完整的一个实验框架（对照 / SRS / 抗 PD-1 / 抗 TIM-3 / 抗 PD-1+SRS / 抗 TIM-3+SRS / 抗 PD-1+抗 TIM-3 / 三联），设计联合实验时可直接参照其分组逻辑。该研究并对 100 天长期存活者做了侧腹再攻击（2×10⁶ GL261-luc2 细胞，PBS 与 Geltrex 1:1），以幼稚小鼠为对照检验免疫记忆。

2.2 共刺激激动

2.3 细胞清除与机制解析

2.4 同型对照

本模型是本汇编中同型对照做得最规范的一个：五篇里四篇按种属与亚型分别配对。做联合实验时“每支抗体各配一支对照”在胶质瘤领域已是惯例，其他模型的文献远未做到这一点。

3. 抗 PD-1（RMP1-14）造模与给药明细

剂量范围：100–250 µg/只。 起始时机 D3 至 D13，接种量 5×10⁴ 至 1×10⁵ 不等。

4. 读数与终点

值得注意： 本模型的两篇同行评议文献都做到了按各自抗体分别配对同型对照（抗 PD-1 配大鼠 IgG2a、抗 OX40 配大鼠 IgG1），这比本汇编其他模型的普遍状况好得多。做联合用药时每个实验臂各配一支对照，是应当沿用的做法。

5. 本模型特有的注意事项

1. 读数是生存期，不是瘤体积。 统计方法、样本量估算、终点定义都与皮下模型不同。
2. 治疗起始时的肿瘤大小与给药剂量是有直接证据的生存期调节因素（见 §1）——这两项必须在方法中明确报告，否则实验无法被他人重复。
3. 接种操作本身是主要变量源：立体定向坐标、注射体积、注射速度、细胞悬液介质均影响成瘤。
4. 恒定区：C57BL/6 背景，同源恒定区为 IgG2c。
5. 血脑屏障：抗体在脑内的暴露量与外周不同，外周 PK 数据（如 PMID 31832706 的 CT26 数据）不能外推到本模型。本汇编未检索到 GL261 模型的脑内暴露量测定。
6. 建议先读综述再设计实验（vdab066），这是本文档能给的最有价值的一条指引。

6. 证据缺口

• 无 GL261 模型中 RMP1-14 的脑内暴露量或靶点结合确认数据。
• 无效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2c LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据。
• 单药抗 PD-1 在本模型中的疗效结论本身即存在争议（见 §1），本汇编不对此作判断。

7. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2c（C57BL/6 背景）。重组小鼠化抗体应优先选用该恒定区；从其他品系的模型沿用抗体会引入同种异体（allotype）不匹配。

8. 参考文献

1. Anti-PD-1 checkpoint blockade monotherapy in the orthotopic GL261 glioma model: the devil is in the detail. Neuro-Oncology Advances. 2021;3(1):vdab066. PMID 34151268.（本模型必读）
2. Triple combination immunotherapy with GVAX, anti-PD-1 monoclonal antibody, and agonist anti-OX40 monoclonal antibody is highly effective against murine intracranial glioma. Oncoimmunology. 2019;8:1577108.（作者待补）
3. Heterogeneity of response to immune checkpoint blockade in hypermutated experimental gliomas. Nat Commun. 2020;11.（作者、文章号待补）
4. Front Immunol. 2025;16:1532528.（作者、标题待补）
5. Anti–PD-1 induces M1 polarization in the glioma microenvironment and exerts therapeutic efficacy in the absence of CD8 cytotoxic T cells. Clin Cancer Res. 2020;26(17):4699.
6. Yamazaki T, et al. J Immunol. 2005;175(3):1586-92. PMID 16034097.
7. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.