LLC（Lewis 肺癌）模型中的体内功能抗体

检索截止 2026-10-27

1. LLC（Lewis 肺癌）模型概述

肺癌的同源模型选择极其有限，LLC 是目前唯一被广泛使用、且可重复的小鼠同源肺癌模型。 该细胞系源自一只荷原发 Lewis 肺癌的 C57BL 小鼠的肺组织，成瘤性强。相较于多数异种移植模型所用的免疫缺陷品系，LLC 的优势在于肿瘤细胞与宿主免疫相容。

本模型的经典用法是“切除原发灶 → 观察肺转移”，以此模拟临床情境：皮下接种入 C57BL/6 小鼠皮下组织后，两周内原发瘤可重复地长到 10 mm；切除原发瘤后，肺转移在 2–4 周内出现。该用法下的主要终点是体重下降与肺转移灶计数，而非原发瘤体积。

LLC 对抗 PD-1 普遍无反应——而且有机制解释。 有研究直接比较了两株 K-Ras 突变的小鼠肺癌细胞系对抗 PD-1 的反应：CMT167 肿瘤被清除，LLC 肿瘤耐药。对回收的肿瘤细胞做 RNA 测序后发现，CMT167 可诱导干扰素-γ 特征基因谱，而该谱在 LLC 中被削弱；在 CMT167 中沉默 Ifngr1 会使其对干扰素-γ 与抗 PD-1 治疗均产生耐药。反过来，LLC 的 SOCS1（干扰素-γ 的抑制因子）基础表达高，沉默 Socs1 后其体外对干扰素-γ 的反应增强，并使肿瘤对抗 PD-1 敏感化，同时伴随肿瘤微环境重塑——T 细胞浸润增加、PD-L1 高表达的髓系细胞富集。

选型含义（与 B16 类似但依据更明确）： LLC 是抗性模型，不适合用来验证某批抗 PD-1 抗体是否有活性——阴性是常态。它的用途是研究耐药机制、或测试联合策略能否翻盘。若需要一个对抗 PD-1 有反应的肺癌模型，上述研究提示 CMT167 是可考虑的对照模型。

品系与恒定区： C57BL/6 背景（Igh1-b 等位），同源恒定区为 IgG2c。

2. LLC（Lewis 肺癌）模型中使用的体内功能抗体

2.1 免疫检查点

9H10 的降量方案值得注意： 首剂 100 µg，后续两剂各 50 µg。这与多数研究的固定剂量方案不同，引用时不要简化为“100 µg × 3”。 9H10 与 9D9 是两个不同的抗 CTLA-4 克隆（9H10 为仓鼠源），本站其他模型页多见 9D9，不要混用。

人源化敲入分支： LLC 亦有 LLC-hPD-L1 衍生株配合 hPD-1 敲入小鼠使用，此类研究评价的是人源分子的抑制剂，剂量与野生型加小鼠替代抗体的研究不可混用。

2.2 微环境与其他靶点

该研究报告 C6D4 提高了 LLC 模型的生存期，并称这是抗 β8 抗体抑制肺癌转移的首次证明。 作者推测其机制涉及抑制免疫抑制性 Treg 的功能或发育。 给药时间点的设计值得借用： 首剂给在原发瘤切除当天，对应临床上的术后辅助治疗情境；这与“荷瘤后按瘤体积入组”的常规设计回答的是不同问题。

2.3 同型对照

C6D4 那条做到了剂量匹配的同型对照；LPT-723 那族则以 vehicle 为对照，未设同型对照抗体——两者可作为规范与不规范的对照示例。

3. 造模条件汇总

四种用法必须区分：
1. 常规皮下 —— 测原发瘤生长；
2. 皮下 + 切除 → 肺转移 —— 测转移，模拟术后辅助情境；
3. 原位肺内接种 —— 肿瘤在合适的微环境中发生，可转移至对侧肺叶、肝、脑与纵隔，模拟晚期疾病；该研究并指出，此类肿瘤的非同义突变负荷与人肺肿瘤相当，且显著高于基因工程小鼠模型，因而可被适应性免疫识别；
4. 人源化敲入 —— 评价人源分子抑制剂。
四者回答的问题不同，剂量与时间表不可互换。

4. 读数与终点

• 切除转移模型的主要终点是体重下降与肺转移灶计数，不是瘤体积。
• 常规皮下模型用瘤体积；原位模型用生存期与转移分布。
• C6D4 研究以体重下降超过 20% 作为停药与终点判据。
• 有研究以血清 IFN-γ、IL-4（ELISA）及瘤内 IFN-γ、颗粒酶 B（免疫组化）作为免疫学读数。

5. 本模型特有的注意事项

1. LLC 是抗性模型，且抗性有机制解释（SOCS1 高表达抑制干扰素-γ 通路，§1）。不要用它判断抗体活性。
2. 需要抗 PD-1 敏感的肺癌模型时，考虑 CMT167（§1）。
3. 四种用法不可混用（§3）；引用剂量前先确认是哪一种。
4. 恒定区为 IgG2c（C57BL/6 背景）。
5. 9H10 与 9D9 是不同的抗 CTLA-4 克隆，9H10 为仓鼠源（§2.1）。
6. 给药起始极早：LPT-723 那族在接种次日（D2）即开始给药，属“预防/早期干预”设计，与按瘤体积入组的治疗性设计不可比。
7. 降量给药方案存在（9H10：100 → 50 → 50 µg），引用时不要简化。

6. 证据缺口

• 抗 PD-1（RMP1-14）在 LLC 中的同行评议剂量记录偏少，现有具体剂量以专利实施例为主。
• 未见清除类抗体（抗 CD8、抗 CD4、抗 Gr-1）在本模型中的具体剂量记录，尽管机制解析实验中应有使用。
• 未见靶点结合确认或暴露量测定。
• 未见效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2c LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据。
• 多数来源未报告同型对照的匹配细节。

7. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2c（C57BL/6 背景）。重组小鼠化抗体应优先选用该恒定区；从 BALB/c 系模型（CT26、4T1、EMT6）沿用抗体会引入同种异体不匹配。

8. 参考文献

1. Tumor-intrinsic response to IFNγ shapes the tumor microenvironment and anti–PD-1 response in NSCLC. Life Science Alliance. 2019;2(3):e201900328.（作者待补；本模型耐药机制的关键文献）
2. Li HY, et al. 2017.（CMT167 与 LLC 对抗 PD-1/PD-L1 反应差异的原始报道；卷期页码待核实）
3. Weiser-Evans MC, et al. 2009.（原位肺内接种模型的建立；卷期页码待核实）
4. McFadden DG, et al. 2016.（突变负荷比较；卷期页码待核实）
5. Discovery of small-molecule PD-L1 inhibitors via virtual screening and their immune-mediated anti-tumor effects. PMC12388884.
6. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
7. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
8. Yamazaki T, et al. J Immunol. 2005;175(3):1586-92. PMID 16034097.（RMP1-14 克隆来源）
9. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
10. 专利出处：US10716782 / US10485796 / US11033537（LPT-723 同族）、US12110334 / US10954304 / US11591402（C6D4 同族）、US12084500。