MB49膀胱癌模型全解析：冷肿瘤微环境、减负暴露给药途径与体内功能抗体文献实操汇编

检索截止 2026-10-29

1. MB49膀胱癌模型概述：本库第一个膀胱癌模型，也是“给药途径”主题最集中的一个

MB49 是尿路上皮癌细胞系，由成年 C57BL/6 雄性小鼠的原代膀胱上皮细胞外植体经 7,12-二甲基苯并蒽（DMBA）处理 24 小时后长期培养而来（Summerhayes 与 Franks，J Natl Cancer Inst. 1979）。该同源膀胱癌模型的使用已超过 35 年。

1.1 免疫表型：定量的“冷肿瘤”

有 CRO 资料给出了少见的定量描述：MB49 属冷肿瘤表型——CD8⁺ 与 CD4⁺ T 细胞浸润极低（<3%），而免疫抑制性髓系群体占比显著（约 65%）。 皮下 MB49 的体内倍增时间约 4 天，这一中等生长速率可为受试药物提供长达三周的给药窗口。

对检查点单药的反应（同一来源）： 抗 mPD-L1、抗 mPD-1、抗 mCTLA-4 三者活性相近且温和，较同型对照组约延缓 2.5 天肿瘤生长；但分别产生 20%、20%、40% 的推定应答者。抗 mCD137 与抗 mGITR 的活性水平与之相近。

这条定量描述对选型有直接价值： 本库其他“冷肿瘤”模型（B16、LLC、SB28、YUMM）多以“抗性”定性描述，MB49 是少数给出 T 细胞与髓系浸润具体比例的模型。约 65% 髓系占比意味着它更适合测试髓系靶向策略，而非单纯的 T 细胞检查点。

品系与恒定区： C57BL/6 背景，同源恒定区为 IgG2c。

1.2 ⚠ 一个必须确认的性别变量

MB49 源自雄性小鼠，表达雄性 H-Y 抗原——在雄鼠中是自身抗原，在雌鼠中是外来抗原，且在肿瘤微环境中高表达。

本库记录到的各研究中，宿主性别选择并不一致：有研究在雄性与雌性中分别设组以区分这一层；也有多项研究只用雌性。

含义：在雌鼠中，肿瘤本身就承受一层针对 H-Y 的排斥反应，这与免疫治疗的效应叠加在一起。 引用 MB49 数据前必须确认宿主性别。 这是本库第二个宿主性别构成关键变量的模型（第一个是 YUMM1.7，源自雄鼠、文献使用雄性宿主）。两者的方向相反：YUMM 用雄鼠是为了避免排斥，MB49 用雌鼠则主动引入了一层排斥。

2. MB49膀胱癌模型最突出的主题：给药途径可以在不损失疗效的前提下降低全身暴露

这是本库中关于给药途径证据最完整的一个模型。

有同行评议研究在 MB49 中系统比较了抗 CTLA-4 的局部与全身给药：

作者结论：局部抗 CTLA-4 治疗与全身给药同等有效，但降低了全身抗体水平与细胞因子释放，并增强了对抗 PD-1 治疗的应答。

实际含义：对于 CTLA-4 这类以免疫相关不良事件著称的靶点，“降低全身暴露”本身就是治疗价值，而不只是省药。

本库累计已在四个模型中记录到给药途径作为独立变量：YTN16P（静脉 vs 腹腔，效果相当）、RENCA（瘤区局部凝胶递送）、4T1（放疗后 PD-L1 峰值的时间窗）、以及本模型（瘤周/瘤内 vs 全身，疗效相当而全身暴露降低十倍）。MB49 这条是其中证据最强、临床含义最直接的一条。

3. 原位（膀胱内灌注）模型：与临床给药方式对应

MB49 有一个与临床高度对应的原位用法——非肌层浸润性膀胱癌的标准治疗正是膀胱内灌注。

⚠ 注意抗 CTLA-4 的剂量只有 10 µg/只——这是本库全部记录中最低的检查点抗体剂量（其他模型常用 100–250 µg/只，或 10 mg/kg）。低一个数量级以上。 这与 §2 的结论一致：在这个模型里，降低暴露不必然降低疗效。

同时注意本条的效应量远高于皮下模型（原位约 90% / 70% 长期生存 vs 皮下仅约 2.5 天生长延缓）。同一细胞系、同一类抗体，接种部位不同，结论差异巨大——这与肺癌 CMT167 的“原位 95% vs 皮下 30%”是同一类现象（见肺癌疾病页）。引用 MB49 数据前必须确认是皮下还是原位。

4. 本模型中使用的体内功能抗体

4.1 免疫检查点

4.2 共刺激激动

G12 的设计值得注意：该抗体不与小鼠 CD40 交叉反应，也不能结合 MB49 肿瘤细胞（MB49 表达小鼠 CD40 但不表达人 CD40）。 因此其抗肿瘤效应只能来自宿主（转基因小鼠）免疫细胞上的人 CD40，而非直接作用于肿瘤细胞——这是一个干净的机制拆分设计。

4.3 髓系归因

考虑到本模型约 65% 的髓系浸润（§1.1），髓系归因实验在此尤其重要。但注意本库髓系克隆页的提醒：清除髓系细胞的同时也清除了其他抗体赖以起效的 Fc 效应执行者，归因实验应配对效应沉默形式的实验抗体。

5. ⚠ 一处与本库既有结论矛盾的记录

本库抗 CTLA-4 克隆页（9D9）记录到一组三档 Fc 对比：在 CT26 中，沉默版完全缓解 0/9、野生型 3/9、ADCC 增强型 8/8，据此得出“抗 CTLA-4 的疗效几乎完全依赖效应功能”。

但本模型有一条方向不同的记录： 有专利实施例报告，Fc 无功能的 CTLA-4 纳米抗体与抗 PD-1 联合，在 MB49、CT26 与 MC38 三个模型中均提供了强抗肿瘤获益，且该获益“不依赖 Fc 功能”。

• 两争记录并不必然冲突，但差别在于单药与联合：9D9 的三档对比是单药比较；本条是与抗 PD-1 联合的比较。

一个可能的解释是：抗 CTLA-4 单药的疗效高度依赖 Treg 清除（需要效应功能），而在与抗 PD-1 联合时，PD-1 阻断提供的效应 T 细胞恢复可以部分替代该机制。 但这只是推论，本轮未检索到直接检验该解释的实验。

对使用者的实际建议：抗 CTLA-4 的 Fc 选择应按用途区分——单药实验优先效应完整（或增强）形式；与抗 PD-1 联合时，Fc 的必要性尚无定论，两种形式都值得作为变量考察。 本库不对此下结论，两侧证据均列出。

6. 造模条件汇总

四点要注意：
– 接种方式包括皮下、皮内与膀胱内灌注三种，效应量差异巨大（§3）。
– 本模型大量使用人源化敲入/转基因小鼠（hVISTA、hCD40、huCTLA4），配套使用人源或人源化抗体——剂量与野生型加小鼠替代抗体的研究不可混用。
– 起始瘤负荷跨度极大：直径 3–5 mm 到 350 mm³。 后者是本库全部记录中最高的起始瘤负荷。
– 宿主性别不统一（§1.2）。

7. 读数与终点

• 皮下模型用瘤体积，公式见有 (长×宽²)/2。
• 原位模型用生物发光成像与总生存。
• 有研究以长径 15 mm 或体重下降超过 20% 为安乐死标准，并明确定义了部分缓解（连续 3 次测量中瘤体积降至初始一半或以下、但 >13.5 mm³）与完全缓解（连续 3 次测量 <13.5 mm³）。
• 全身抗体水平与血清 IL-6 是本模型特有的读数（§2）——用于评价局部给药的暴露优势。
• 外周免疫表型：CD4⁺Ki67⁺、CD4⁺ICOS⁺ 比例（D5）。

本模型明确定义 PR/CR 判据的做法值得借用。 本库多数来源只报告平均瘤体积，无法区分“整体缩小”与“部分动物完全缓解”——而这两者的临床含义完全不同。

8. 对照与样本量

RSV-m 那条值得单独指出：对照抗体带有与实验抗体相同的 S239D/I332E（ADCC 增强）突变。 这是本库中最严格的一种对照设计——不仅匹配亚型，还匹配 Fc 工程改造。若实验抗体经过 Fc 增强而对照未经改造，两者的 Fc 相关效应不可比。

9. 本模型特有的注意事项

1. 恒定区为 IgG2c（C57BL/6 背景）。
2. 宿主性别是关键变量（H-Y 抗原，§1.2）。
3. 皮下、皮内、膀胱内灌注三种方式效应量差异巨大（§3、§6）。
4. 大量使用人源化敲入小鼠，剂量不可与野生型体系混用（§6）。
5. 给药途径可在不损失疗效的前提下降低全身暴露十倍以上（§2）。
6. 原位模型的抗 CTLA-4 剂量低至 10 µg/只，为本库最低（§3）。
7. 髓系占比约 65%，适合测试髓系靶向策略（§1.1）。
8. 抗 CTLA-4 的 Fc 依赖性在单药与联合用药下可能不同（§5）。
9. 起始瘤负荷跨度极大，最高见 350 mm³（§6）。

10. 证据缺口

• 多数检查点抗体的具体克隆号未注明（CRO 资料与部分专利仅写“抗 mPD-1”、“抗 mCTLA-4”）。
• §2 的局部给药研究中抗 CTLA-4 的具体剂量与克隆未在可检索片段中出现，须调阅全文。
• 未检索到清除类抗体（抗 CD8、抗 CD4、抗 NK）在本模型中的具体剂量。
• 未检索到效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2c LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据（VSTB124 为 mIgG2a + ala/ala，属人源化体系）。
• §5 的矛盾未有直接检验实验。
• 未见靶点结合确认；但 VISTA 那组研究测定了 PK 与 ADA，是本库少数例外之一。

11. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2c（C57BL/6 背景）。

效应功能方向速查： 抗 PD-1 不需要且有害；抗 PD-L1、抗 CTLA-4（单药）、抗 TIGIT、抗 VISTA 需要；抗 TIM-3、抗 NKG2A 不需要；激动型依赖 FcγRIIB 交联，不可用沉默骨架。抗 CTLA-4 在与抗 PD-1 联合时的 Fc 必要性见 §5。

12. 参考文献

1. Summerhayes IC, Franks LM. J Natl Cancer Inst. 1979.（MB49 的来源文献）
2. van Hooren L, et al. Local checkpoint inhibition of CTLA-4 as a monotherapy or in combination with anti-PD1 prevents the growth of murine bladder cancer. Eur J Immunol. 2017. doi:10.1002/eji.201646583.（§2 的给药途径比较）
3. Immune checkpoint therapy as a treatment option for non-muscle invasive bladder cancer. Cancer Res. 2024;84(6_Suppl):2657.（会议摘要；§3 的原位灌注模型与生存数据）
4. Wasiuk A, et al. Cancer Immunol Immunother. 2012;61:2273-82.（MB49 的 H-Y 抗原特性）
5. Le Mercier I, et al. Cancer Res. 2014;74(7):1933-44.（抗小鼠 VISTA 的原始抑瘤报告）
6. Francisco JA, et al. Cancer Res. 2000.（S2C6 参照抗体）
7. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
8. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
9. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
10. 专利及CRO资料出处：US12358986、US11014987、US12441801、US11987630、US10899836、US9676862、US10640567、US11149090、US12384845、US12435142 及 Labcorp MB49 模型技术资料。