A20 B细胞淋巴瘤模型中的体内功能抗体

文献报告的实验条件汇编｜文献汇编，编纂方无自有实验数据

收录状态：本页目前仍无同行评议全文论文提供具体给药参数。第二轮检索补到一条同行评议期刊的会议摘要（J Immunother Cancer. 2014;2(Suppl 3):P106），其余剂量记录来自专利实施例与临床试验方案附件。

版本 1.0 ｜ 检索截止 2026-09-13 ｜ 证据分级：◆ 同行评议 ｜ ○ 专利实施例

1. A20 B细胞淋巴瘤模型概述：本站第一个血液肿瘤模型

A20 是 BALB/c 来源的小鼠 B 细胞淋巴瘤细胞系（ATCC CRL-TIB-208，登记名为 Reticulum Cell Sarcoma）。它是本站现有模型中唯一的血液肿瘤模型，其余均为实体瘤。实际使用中多以皮下移植成实体瘤块进行，因此读数与实体瘤模型相通，但生物学背景不同——肿瘤细胞本身就是 B 细胞，这一点在设计涉及 B 细胞或抗体依赖机制的实验时必须纳入考虑。

对单药检查点阻断反应有限，且有明确的机制解释：
有研究报告：A20 表达 PD-L1 但不表达 Qa-1b；皮下接种入 BALB/c 后，成瘤组织中 PD-L1 表达保留，而 Qa-1b 表达被诱导。肿瘤生长受 NK 细胞与 CD8 T 细胞控制。尽管许多浸润免疫细胞高表达 PD-1、肿瘤细胞高表达 PD-L1，抗 PD-1 或抗 PD-L1 单药仅带来中等程度的生长抑制。

该研究给出了具体计数：同型对照组 9 只，无部分缓解、无暂时性完全缓解、无完全缓解；抗 PD-1 组 9 只中 2 只完全缓解；抗 PD-L1 组 10 只中 2 只完全缓解。

机制线索：超过 50% 的 A20 瘤内浸润 NK 细胞、以及约 10% 的 CD8 T 细胞表达 CD94/NKG2A，且 NKG2A⁺ CD8 T 细胞同时共表达 PD-1。 配合 Qa-1b（NKG2A 的配体）在成瘤后被诱导这一现象，NKG2A/Qa-1b 轴被提示为本模型中限制检查点疗效的抑制通路。

选型含义： A20 与 LLC 类似——都是“抗性有机制解释”的模型，适合用来测试联合策略能否突破特定抑制通路，不适合用来验证抗体活性。区别在于 LLC 的抗性机制在干扰素-γ 通路（SOCS1 高表达），A20 的抗性机制指向 NKG2A/Qa-1b 与 NK 细胞。

品系与恒定区： BALB/c 背景（Igh1-a 等位），同源恒定区为 IgG2a，与 CT26、4T1、EMT6、RENCA 一致。

2. A20 B细胞淋巴瘤模型中使用的体内功能抗体

2.1 免疫检查点

US10870700 的效应量记录完整，可作为本模型的基线参照： 抗 PD-1 组 9 只中 2 只完全缓解，抗 PD-L1 组 10 只中 2 只完全缓解，同型对照组 9 只中 0 只——单药可诱导少数完全缓解，但多数动物无反应。终点为瘤体积 >2000 mm³、溃疡或坏死。 US10716782 一族的效应量： LPT-723 单药使中位瘤体积下降 43%，与抗 PD-1 联合下降 79%（D15）。

2.2 抗 CD20 与给药顺序——本模型最重要的一组发现

先前标注的“B 细胞淋巴瘤模型却无抗 CD20 记录”这一空缺已补上，而且这组数据的价值不在剂量，在顺序。

结果（原文报告）：
– 不给抗 CD20 时，抗 CD137 与抗 PD-1 联合优于各自单药，且呈剂量依赖（肿瘤生长与生存期均 p<0.001）；但无小鼠获得长期治愈。
– 在抗 CD20 之后给予该联合方案时，优效性呈顺序依赖（p<0.001）；当抗 CD20 先于联合免疫治疗给药时，全部小鼠获得长期治愈，并对再攻击产生保护。

同一组药、同样的剂量，只调换给药顺序，结果从“无一治愈”变成“全部治愈”。 这是本站十四个模型页中关于给药顺序最强的一条证据。此前记录到的顺序/时机相关观察有三条——4T1 的放疗后 PD-L1 峰值时间窗、RENCA 的瘤区局部递送、EL4 的“抗体上午、疫苗下午、间隔≥4 小时”——但只有这一条把顺序做成了主变量并给出全有全无的结果。

实际含义：联合方案的设计中，“先给哪个”可能与“给多少”同等重要，而多数研究只规定同日或同期给药。

2.3 共刺激激动（ICOS）——本模型的一组重点数据

该实验的设计值得单独看：抗 ICOS 单次给药即显示强抗肿瘤效力。 专利文本明确指出该实验确认了 STIM003 mIgG2a 单药的抗肿瘤效力，且短暴露后即可观察到强效力。 含义：并非所有抗体都需要多次给药。 本站其他模型页的方案几乎全是多次给药，本条是少见的单次给药与多次给药直接对比的记录，设计给药方案时值得参考。

2.4 双特异性抗体——含一组值得抄的对照设计

3. 造模条件汇总

接种量 5×10⁵ 至 1×10⁶，起始时机 D8 至 D13 或按瘤体积 80–120 mm³。 本模型的条件离散度小于 MC38、EMT6 等，跨研究可比性相对较好。
一个值得借用的报告规范： US12404330 一族明确报告了细胞传代数（<P20）与接种时活率（>85%）。传代数与活率影响成瘤率与生长速度，多数研究不报告这两项——这是本站所有来源中报告得最完整的一条。

4. 读数与终点

• 瘤体积公式：改良椭球公式 ½(长 × 宽²)（US12404330 同族、US11629189）。
• 测量频率：自接种当天起每周 3 次测体重与瘤体积。
• 终点：平均直径 12 mm，或出现瘤体溃疡（动物福利）；US10870700 以瘤体积 >2000 mm³、溃疡或坏死为处死标准。
• 缓解分级：US10870700 区分了部分缓解、暂时性完全缓解、完全缓解三档——这种分级比单纯报告平均瘤体积更能反映应答的异质性，值得借用。

5. 对照与样本量

本页再次出现以生理盐水或载体替代同型对照的做法。累计本站已在 MC38、4T1、RENCA、LLC、A20 五个模型中见到这一缺陷，可以认定为文献中的系统性问题，而非个别研究的疏漏。

6. 证据缺口

• 抗 CD20 的给药记录 已补上（18B12，小鼠 IgG2a，D5 腹腔；见 §2.2），但来源为会议摘要，未见全文论文。
• 清除类抗体（抗 CD8、抗 NK1.1、抗 asialo GM1）的具体剂量未检索到，尽管 US10870700 明确指出肿瘤生长受 NK 与 CD8 T 细胞控制，相关验证实验应有使用。注意本模型为 BALB/c 背景，PK136（抗 NK1.1）不适用，须用 TM-β1 或抗 asialo GM1。
• 抗 NKG2A 的克隆与货号已补齐（20D5，Bio X Cell BE0321；替代抗体为小鼠 IgG1-D265A 形式，见 NK 克隆页 §4），但本模型中的具体剂量数值仍须调阅原文（André P 等，Cell. 2018）。
• 抗 PD-1 剂量的两套记录（200 µg/只 与 10 mg/kg）来源均为专利实施例，缺同行评议来源。
• 未见靶点结合确认或暴露量测定。
• 未见效应功能失活形式（mIgG1 D265A、mIgG2a LALA-PG）在本模型中的公开剂量数据。

7. 本模型特有的注意事项

1. 恒定区为 IgG2a（BALB/c 背景）。从 C57BL/6 系模型沿用 IgG2c 版本会引入 allotype 不匹配。
2. 肿瘤细胞本身是 B 细胞——设计涉及 B 细胞、抗体产生或 Fc 受体机制的实验时需额外注意。
3. 抗性机制指向 NKG2A/Qa-1b 与 NK 细胞（§1），与其他模型的 T 细胞中心视角不同。
4. 激动型抗体（ICOS）用 mIgG2a，不可用沉默骨架（§2.2）。
5. 单次给药可能已足够（§2.2），不必默认多次给药方案。
6. 双抗实验需同时设同型对照与单臂对照（§2.3）。
7. PK136 不适用于本品系（§6）。
8. 给药顺序可能与剂量同等重要（§2.2）——抗 CD20 先行与否决定了「无一治愈」与「全部治愈」。

8. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2a（BALB/c 背景）。重组小鼠化抗体应优先选用该恒定区；从 C57BL/6 系模型沿用抗体会引入同种异体不匹配。

9. 参考文献

1. Martin RM, Brady JL, Lew AM. The need for IgG2c specific antiserum when isotyping antibodies from C57BL/6 and NOD mice. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
2. Dahan R, et al. FcγRs modulate the anti-tumor activity of antibodies targeting the PD-1/PD-L1 axis. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
3. Yamazaki T, et al. J Immunol. 2005;175(3):1586-92. PMID 16034097.（RMP1-14 克隆来源）
4. Sequential tumor and dual immune targeted immunotherapy: anti-lymphoma activity of rituximab with 4-1BB stimulation and PD-1 blockade. J Immunother Cancer. 2014;2(Suppl 3):P106. doi:10.1186/2051-1426-2-S3-P106.（会议摘要；抗 CD20 与顺序依赖数据）
5. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
6. 专利出处：US10870700、US12404330 / US9957323 / US11858996（抗 ICOS 同族）、US11629189（ICOS × PD-L1 双抗）、US10716782 / US10485796 / US11033537 / US9861621、US11690911。