CT26结肠癌模型中的抗 PD-1（RMP1-14）应用

文献汇编声明：所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处，非推荐剂量。

检索截止 2026-10-22

1. CT26结肠癌模型概述

CT26 为 N-亚硝基-N-甲基氨基甲酸乙酯诱导的 BALB/c 小鼠结肠癌细胞系，属高突变负荷的“热”肿瘤，对单药 PD-1 阻断有可检出但不完全的反应——这一特性使其常用于联合用药的增益评估。

与 MC38 的关键差异：品系不同。 CT26 为 BALB/c 背景（Igh1-a 等位，表达 IgG2a），MC38 为 C57BL/6（Igh1-b 等位，表达 IgG2c）。使用重组小鼠化抗体时，CT26 的同源恒定区是 IgG2a，不是 IgG2c；两者氨基酸序列差异约 16%（Martin 等 1998）。这一点在跨模型沿用同一支抗体时最易被忽略。

本模型的接种方式在文献中至少有三种：皮下、皮内、腹腔播散。三者的成瘤动力学与免疫微环境不同，剂量数据不可互相套用。

2. CT26结肠癌模型中使用的其他体内功能抗体

2.1 免疫检查点

RMT3-23 那条含一个可直接借用的设计要点： 因 TIM-3 在 CT26 中表达较晚，研究者刻意降低接种量（2×10⁵）以减缓生长、为靶点表达留出时间窗。靶点表达的时间动力学决定接种量与起始时机——这是设计联合实验时容易忽略的一环。

2.2 共刺激激动

2.3 细胞清除与机制解析

NK 清除抗体的品系限制： PK136（抗 NK1.1）仅适用于 C57BL/6，BALB/c 不可用，须改用 TM-β1（抗 CD122）或抗 asialo GM1。这是跨品系照搬清除方案最容易踩的坑。

2.4 血管生成通路

2.5 同型对照——本模型有一条值得注意的做法

US10077306 同族在抗 TIM-3 与抗 PD-1 各 250 µg 的联合实验中，同型对照给到 500 µg——即两支实验抗体剂量之和。
这解决了联合实验中一个常被忽略的问题：单支对照无法匹配联合组的总蛋白负荷。按总量匹配或每支各配一支对照，两种做法都可接受；用单支 250 µg 对照去配 500 µg 的联合组则不可接受。

3. 造模条件汇总

接种量跨度：3×10⁴ 至 2×10⁶，超过一个数量级。 起始时机从接种后第 3 天到瘤体积 300 mm³ 不等。看剂量前先看这两栏。

4. 抗 PD-1（RMP1-14）给药方案

范围：200–250 µg/只，或 2.5–10 mg/kg。 以 20 g 小鼠计两者大致收敛于 10 mg/kg 附近，但换算依赖体重假设。

5. 一条含完整对照组数值的记录

US11932696 报告（2×10⁵ 皮内，200 µg/只 × 3 次，每组 8 只）：

观察期内（至 D20）8 只中 1 只完全消退。三个时间点差异均显著。这是本汇编中少见的、给出了完整对照组数值与离散度的来源，可用于估计效应量与组内变异的量级。注意对照组标准差接近均值的一半——CT26 皮下模型的组内变异相当大，样本量设计时应纳入考虑。

6. 对照与样本量

已收集来源中无一报告对照在缓冲液、内毒素、批次上的匹配情况。

7. 本模型特有的注意事项

1. 恒定区选择：BALB/c 背景，重组小鼠化抗体的同源恒定区为 IgG2a。从 MC38 实验直接沿用 IgG2c 版本会引入 allotype 不匹配。
2. 接种方式必须写清：皮下、皮内、腹腔播散三种在文献中并存，套用剂量前须确认来源用的是哪一种。
3. 组内变异大（见 §4），小样本量下易得出假阴性。
4. 同行评议证据薄弱：本模型的 RMP1-14 剂量数据以专利实施例为主，仅有的两篇同行评议中，一篇为腹腔播散模型且用自制抗体，另一篇用的是 29F.1A12 而非 RMP1-14。这是本文档最大的局限。

8. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

本模型的同源恒定区：IgG2a（BALB/c 背景）。重组小鼠化抗体应优先选用该恒定区；从其他品系的模型沿用抗体会引入同种异体（allotype）不匹配。

9. 参考文献

1. IL-18-primed NK cells recruit dendritic cells and potentiate tumor therapy mediated by PD-1 blockade. Front Oncol. 2025;15:1533808.（作者待补）
2. Subclone from CT26 resistant to anti-PD-1 therapy associated with increased expression of genes related to glucocorticoids. PMC11209639.
3. Quantification of the anti-murine PD-1 monoclonal antibody RMP1-14 in BALB/c mouse plasma by LC-MS/MS. PMID 31832706.
4. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.
5. Yamazaki T, et al. J Immunol. 2005;175(3):1586-92. PMID 16034097.
6. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
7. 专利：US11932696 / US10550191、US10570138、US11046760、US11840570、US12076371、US11629189。