抗小鼠PD-1单抗(RMP1-14)：亚型、Fc 形式、跨模型剂量与可得来源

克隆层文档：本页回答“这支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”；造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。

文献汇编声明：编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处，非推荐剂量。
版本 1.0 ｜ 检索截止 2026-09-13 ｜ 证据分级：◆ 同行评议 ｜ ○ 专利实施例

1. 抗小鼠PD-1单抗克隆RMP1-14概述

RMP1-14 是文献引用量最大的抗小鼠 PD-1 单克隆抗体。由 Sprague Dawley 大鼠免疫小鼠 PD-1 转染的 BHK 细胞制备，融合伙伴为 P3U1 骨髓瘤，原生形式为大鼠 IgG2a κ。可同时阻断 PD-L1-Ig 与 PD-L2-Ig 与 PD-1 的结合。原始表征见 Yamazaki 等 2005（J Immunol 175(3):1586-92，PMID 16034097）。

靶点： PD-1（Pdcd1，CD279），50–55 kDa 细胞表面受体，Ig 超家族 CD28 家族成员，短暂表达于 CD4/CD8 胸腺细胞及活化的 T、B 淋巴细胞与髓系细胞，抗原清除后表达下降。

2. 选择克隆RMP1-14前必须知道的四件事

2.1 效应功能对抗 PD-1 有害，不是中性

Dahan 等（Cancer Cell 2015;28(4):285-295，PMID 26373277）报告：抗 PD-1 抗体的体内活性不依赖 FcγR，且具备 FcγR 结合能力反而削弱抗肿瘤活性。提出两条机制——ADCC 清除 PD-1⁺ 效应 T 细胞，以及 FcγRIIB 依赖的 PD-1 激动作用。抗 PD-L1 则相反，其疗效依赖 ADCC 清除瘤内 PD-L1⁺ 髓系细胞。

含义： 原生大鼠 IgG2a 具中等效应功能，其观察到的效应是阻断与 Fc 介导活性的叠加，可能低估纯阻断的贡献。若目的是模拟临床 PD-1 阻断（临床获批的人源 PD-1 抗体均为低效应功能 IgG4），应选效应沉默形式。

2.2 亲和力低于 29F.1A12 约 100 倍

有比较研究报告：RMP1-14 虽能染色并阻断 PD-1，但亲和力比 1A12（29F.1A12）低约 100 倍。两者同为大鼠 IgG2a、机制相同，但剂量-效应关系不同；由于 RMP1-14 的阻断持续性较弱，用它做联合用药实验时可能错误估计第二个药物的效力。

选型建议： 需要准确评估第二个药物效力的联合实验，优先考虑 29F.1A12；需要与既往文献可比时，选 RMP1-14。

2.3 兼具激动活性

有研究报告 RMP1-14 为双功能抗体：既有相当程度的阻断活性，也有与激动型克隆 RMP1-30 相当的激动活性。两种活性均受靶细胞 PD-1 表达水平影响——高表达细胞更倾向表现激动效应，低表达细胞更利于检出阻断效应。该文认为在生理相关 PD-1 水平下主要表现为阻断剂。

易混淆点： RMP1-30 不阻断 PD-1 与 PD-L1/PD-L2 的相互作用，而 J43 与 RMP1-14 阻断。有 GL261 综述将克隆间的这种内在差异，与剂量、给药时机、给药途径并列为该模型结论不一致的可能成因。

2.4 反复给药存在超敏反应风险

已有报道：在荷瘤小鼠中反复注射异种抗 PD-1 或抗 PD-L1 抗体可诱发致死性超敏反应（Mall C 等，Oncoimmunology. 2016;5(2):e1075114）。

旁证：大鼠 IgG2b 抗 GITR 激动抗体 DTA-1 反复腹腔给药（第 3 次、≥1.0 mg/kg）可诱发过敏反应，血清中检出总 IgE 及针对大鼠可变区/Fc 区的抗药 IgG1 与 IgG2b；嵌合化或小鼠化后可抑制该免疫原性介导的过敏反应（J Immunother Cancer 2015 会议摘要，DOI 10.1186/2051-1426-3-S2-P182）。

一条实测记录（EMT6 模型）：有专利文件明确记载，其疗效实验改用了亲本小鼠杂交瘤抗体的效应失活版本，原因是人源化版本引发了强烈的抗种属药物反应、限制了暴露量。这是异种或人源化抗体在免疫功能正常小鼠中因抗药反应导致暴露不足、被迫改用小鼠化替代抗体的直接实例（US11359024）。

尚缺的数据：未检索到专门测定 RMP1-14 在小鼠中 ADA 滴度及其对清除速率、后续剂量效应影响的定量原始研究。风险已确立，但无出现时间窗或剂量阈值。涉及长疗程或反复给药时，这不只是效力衰减问题，而是动物福利与实验安全问题。

3. 抗小鼠PD-1单抗(RMP1-14)恒定区形式与品系匹配

C57BL/6、C57BL/10、SJL、NOD 携带 Igh1-b 等位，IgG2a 基因缺失、表达 IgG2c；BALB/c 等 Igh1-a 品系表达 IgG2a、IgG2c 基因缺失。两者氨基酸序列差异约 16%（Martin RM 等，J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92，PMID 9672206）。

可用的恒定区形式：

小鼠实验不能沿用灵长类的 Fc 沉默方案。N297G（NG）与 D265A+N297G（DANG）在小鼠中仍保留强补体激活能力；只有 LALA-PG 在小鼠 IgG2a 与人 IgG1 中同时消除补体结合与 FcγR 依赖的 ADCC；单用 LALA 的小鼠 IgG2a 对 FcγRIII 与 FcγRIV 仍保留减弱的结合（Lo 等，J Biol Chem. 2017;292:3900-3908）。看具体突变，不要看“效应沉默”四个字。代价：完全沉默变体相对野生型 IgG1 有显著的热稳定性下降（Hale，Immunol Rev. 2024），影响保存与冻融。

4. 抗小鼠PD-1单抗(RMP1-14)跨模型剂量速查表

本表按模型排列，回答“这支克隆在各模型里大家用多少”。造模条件、对照设置与逐条文献见各模型页——剂量不能脱离造模条件解读，接种量与入组瘤体积在各模型间跨度极大。

跨模型观察：

• 收敛值约 200 µg/只 或 10 mg/kg。以 20 g 小鼠计两者基本等价；但换算依赖体重假设，跨单位比较须注明所用体重。有 GL261 综述在横向比较时即统一按 20 g 折算。
• B16 与 GL261 的用法离散度最大：B16 有接种次日即起始的，也有等到 150 mm³ 的；GL261 有综述指出，治疗开始时的肿瘤大小与给药剂量是有直接证据调节生存期的两个因素。
• B16 的数据几乎全部来自联合方案（放疗、疫苗、多重检查点），无单药剂量-效应关系可读。
• 4T1 的剂量跨度是所有模型中最大的：1 mg/kg 至 250 µg/只（约 12.5 mg/kg），相差一个数量级以上。低剂量常用作与其他药物比较的参照线，非最优剂量；引用时须连同实验目的一起看。
• 小鼠化重组形式已出现一条公开体内给药记录。RENCA 模型中有同行评议研究使用了 RMP1-14 衍生的小鼠源单抗（InvivoGen），200 µg/只、D12/16/19/23/26 腹腔（Sci Rep 2023）。原文未注明亚型与 Fc 突变，须核对供应商货号后才能确认是哪一种形式（该供应商的 RMP1-14 重组版为小鼠 IgG1 D265A）。除此一条外，效应功能失活形式在各模型中仍无系统的公开剂量数据。

5. 抗小鼠PD-1单抗(RMP1-14)：抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

5.1 RMP1-14 各形式

5.2 对照克隆（选型比较用）

5.3 配套同型对照

配对规则：对照须与实验组在亚型、种属、形式、Fc 突变、缓冲液、内毒素规格上一致。使用重组小鼠化或效应沉默形式时，不能沿用原生大鼠 IgG 对照——那会同时引入种属、亚型、效应功能、缓冲液四重差异。

5.4 含 RMP1-14 臂的双特异性抗体

5.5 常见规格要求

6. 使用注意事项小结

1. 按品系选恒定区：C57BL/6 系模型用 IgG2c，BALB/c 系用 IgG2a（§3）。
2. 阻断用途优先效应沉默形式，并核对具体突变而非标签（§2.1、§3）。
3. 联合用药实验考虑改用 29F.1A12，避免低估第二个药物的效力（§2.2）。
4. 长疗程需评估 ADA 与超敏风险，考虑小鼠化形式（§2.4）。
5. 对照必须同恒定区、同突变（§5.3）。
6. 引用文献剂量前先核对该文献所用的恒定区与造模条件（§4）。

7. 证据缺口

• 效应功能失活形式的公开体内剂量数据仍然稀少，目前仅 RENCA 一条，且形式待核实（见 §4）。
• RMP1-14 的 ADA 定量数据缺失：风险有报道，但无滴度、时间窗与剂量阈值。
• 多数来源未报告靶点结合确认或暴露量测定；仅有一篇 LC-MS/MS 定量方法学论文可作技术参考（PMID 31832706）。
• 绝大多数来源未报告同型对照在缓冲液、内毒素、批次上的匹配情况。

8. 参考文献

1. Yamazaki T, et al. J Immunol. 2005;175(3):1586-92. PMID 16034097.（RMP1-14 制备与初步表征）
2. Dahan R, et al. FcγRs modulate the anti-tumor activity of antibodies targeting the PD-1/PD-L1 axis. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.
3. Mall C, et al. Repeated PD-1/PD-L1 monoclonal antibody administration induces fatal xenogeneic hypersensitivity reactions in a murine model of breast cancer. Oncoimmunology. 2016;5(2):e1075114.
4. Martin RM, Brady JL, Lew AM. The need for IgG2c specific antiserum when isotyping antibodies from C57BL/6 and NOD mice. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.
5. Lo M, et al. Effector-attenuating substitutions that maintain antibody stability and reduce toxicity in mice. J Biol Chem. 2017;292(9):3900-3908.
6. Baudino L, et al. Crucial role of aspartic acid at position 265 in the CH2 domain for murine IgG2a and IgG2b Fc-associated effector functions. J Immunol. 2008;181(9):6664-9.
7. Hale G. Living in LALA land? Forty years of attenuating Fc effector functions. Immunol Rev. 2024.
8. Anti-PD-1 checkpoint blockade monotherapy in the orthotopic GL261 glioma model: the devil is in the detail. Neuro-Oncology Advances. 2021;3(1):vdab066. PMID 34151268.
9. A comparison of murine PD-1 and PD-L1 monoclonal antibodies. PMC9451140.（§2.2 依据，卷期待补）
10. Identification of anti-mouse PD-1 agonist antibodies that inhibit T cell activation. PMC12500435.（§2.3 依据，卷期待补）
11. Quantification of the anti-murine PD-1 monoclonal antibody RMP1-14 in BALB/c mouse plasma by LC-MS/MS. PMID 31832706.
12. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410. 各模型的完整文献列表见对应模型页。