其他共抑制检查点VISTA/腺苷通路(CD39/CD73)/TIGIT抗体选型与剂量指南

克隆层文档：本页回答“这几支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”；造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。

文献汇编声明：编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处，非推荐剂量。
版本 1.0 ｜ 检索截止 2026-09-13 ｜ 证据分级：◆ 同行评议 ｜ ○ 专利实施例

1. 本页最有价值的一条：五个检查点靶点的同剂量头对头

本库上百条记录中，几乎所有效应量都来自不同研究、不同剂量、不同造模条件，因此跨靶点比较一直无法进行。 本轮检索到一个例外。

有专利实施例在同一个 CT26 实验中，以完全相同的剂量与时间表平行比较了五个检查点靶点：

平行比较的抗体： 同型对照、抗 PD-L1（10F.9G2）、抗 VISTA（V4）、抗 TIGIT（1G9）、抗 LAG-3 (C9B7W)、抗 TIM-3 (RMT3-23)，以及抗 PD-L1 与其余各支的两两联合。

报告结果：抗 VISTA 克隆 V4 的抑瘤率约 60%，在该实验中是所有单药里最强的一个，且与抗 PD-L1 联合的表现也优于其他组合。

这是本库唯一一组“同模型、同剂量、同时间表”的跨靶点比较，因此值得单独引用。

但必须同时说清三条限制：

1. 来源是专利实施例，未经同行评议，且申请人正是抗 VISTA 抗体的开发方——在这类文件中自家靶点表现最优，需要打折看待。
2. 300 µg 对某些靶点可能不是最优剂量。 本库记录显示各靶点的常用剂量差异很大（抗 PD-L1 常用 16–200 µg，抗 LAG-3 常用 200–250 µg，抗 TIM-3 250 µg）——同剂量比较保证了公平性，却未必让每支抗体都处在自己的最优点。
3. 单一模型（CT26）的结论不能外推——本库已多次记录同一方案跨模型结论相反。

尽管如此，它仍是本库中唯一能回答“在同一条件下谁更强”的实验设计，这类设计本身值得推广。

另一组该专利的方案： CT26 同法造模，每两周给药，300 µg 抗 VISTA V4、200 µg 抗 PD-L1 10F.9G2、或两者联合，以 PBS 为对照；终点为对照组肿瘤长径 >1.5 cm；实验末取瘤做 RNA-seq 分析 MDSC、CD8⁺ T 与 Treg 的相对数量。

2. VISTA：一个有配对 Fc 对比实验的靶点

VISTA 是 T 细胞的负向调控分子，表达于多数造血细胞，在肿瘤微环境中高表达。

2.1 效应功能是必需的——而且有配对实验证明

有专利实施例的标题即为“抗 VISTA 抗体的抑瘤作用需要效应功能”，其设计是本库中最干净的一类：

同一可变区、同一亚型，唯一差别是 Fc 沉默突变。

实验条件：

这个实验做了两件本库其他研究几乎都没做的事：

1. 配对的 Fc 对比（同可变区、仅差沉默突变）——本库仅在抗 CTLA-4（9D9 三档）、抗 PD-L1（IL7 融合分子）、抗 4-1BB（20G2 的 DAPG 版）与本条上见到。
2. 同时测定了 PK 与 ADA——本库上百条记录中，明确报告 ADA 测定的不超过五条。

本库 Fc 方向汇总（十三类）： 抗 PD-1 有害 ｜ 抗 PD-L1 小鼠有益、临床无定论 ｜ 抗 CTLA-4 几乎必需且可增强 ｜ 抗 TIGIT 依赖 ADCC ｜ 抗 TIM-3 不需要 ｜ 抗 LAG-3 无数据 ｜ 抗 VISTA 必需（本页） ｜ 抗 NKG2A 不需要 ｜ 抗 CD25 必需但需优化 ｜ 抗 VEGF-A 宜沉默 ｜ 抗 VEGFR-2 宜沉默（推论） ｜ 激动型依赖 FcγRIIB 交联 ｜ 腺苷通路（CD39/CD73）无数据。

2.2 MB49 模型有一个必须知道的性别变量

MB49 细胞表达雄性 H-Y 抗原——在雄性小鼠中是自身抗原，在雌性小鼠中是外来抗原，且在肿瘤微环境中高表达。

这意味着同一个 MB49 实验，在雄鼠与雌鼠中的免疫学基础完全不同：雌鼠对肿瘤本身就有一层针对 H-Y 的排斥反应。 上述研究刻意在雄性与雌性 hVISTA KI 小鼠中分别设组，正是为了区分这一层。

这是本库第二个宿主性别构成关键变量的模型（第一个是 YUMM1.7，源自雄性小鼠，文献使用雄性宿主）。引用 MB49 数据前必须确认宿主性别。

2.3 一组髓系机制读数

同一专利另有实验报告：VSTB123 或 VSTB124 治疗后，荷瘤小鼠的髓系浸润增加；VSTB123（效应完整）治疗还使肿瘤浸润巨噬细胞的 CD80 活化标志表达升高。 给药于接种后 D7、9、11，腹腔 0.2 mL、10 mg/kg。

该研究还用抗 GR1（RB6-8C5，大鼠 IgG2b，12.5 mg/kg）配对照大鼠 IgG2b（LTF-2），以及氯膦酸盐脂质体 200 µg，做髓系清除的归因实验。 这里同时确认了两个本库先前标“待核实”的同型对照：C1.18.4 为小鼠 IgG2a 对照，LTF-2 为大鼠 IgG2b 对照，且两者都按对应实验抗体的剂量配对给药。

3. 腺苷通路：CD39、CD73、A2AR——同一条通路，效果差很多

腺苷通路是本库唯一的“酶+受体级联”靶点组：CD39 把细胞外 ATP 水解为 AMP，CD73 再把 AMP 转为腺苷，腺苷经 A2A/A2B 受体抑制 T 细胞与 NK 细胞。

与本库其他靶点的性质差异：其他靶点是受体或配体，阻断的是分子间相互作用；CD39 与 CD73 是酶，阻断的是催化活性。 这意味着效力可以直接用酶活测定读出，而不只是结合与占位——本库中仅有的可做“酶活抑制”读数的靶点。

3.1 一组通路内的头对头：在 MC38 中三个节点效果并不等价

有研究在 MC38 模型中比较了阻断该通路不同节点的单药活性：

抗 CD39 的单药活性与抗 PD-1（RMP1-14）相当；而针对 CD73、A2AR 的其他抑制剂与抗体，在该模型中的单药效果远不及抗 CD39。

进一步的拆分显示：抗 CD73（克隆 2C5）与 A2AR 抑制剂（SCH58261）只有在与抗 CD39 联合时才观察到活性，且该联合的抗肿瘤活性主要仍由抗 CD39 贡献。 即便在 Nt5e（CD73）⁻/⁻、Adora2a⁻/⁻、Adora2b⁻/⁻ 品系中从接种时即使用两种抗 CD73 抗体、A2AR 抑制剂或 A2BR 抑制剂，结论亦相近。

这是本库第二组“同通路不同节点”的头对头（第一组为血管生成的 DC101 / MF1 / mF4-31C1，见抗 VEGFR 克隆页）。两组都指向同一条结论：同一通路的不同靶点不可互换，选错节点会得出该通路无效的错误结论。

3.2 机制不是“减少腺苷”，这一点改变了读数设计

同一研究报告：抗 CD39 的抗肿瘤活性关键依赖 细胞外 ATP–P2X7–ASC–NALP3 炎症小体–IL-18 通路，而不只是减少腺苷。其疗效基础包括：瘤内髓系亚群上 CD39 与 P2X7 的共表达、早期的巨噬细胞清除特征，以及活化的 IL-18 释放，后者促成瘤内效应 T 细胞的显著扩增。抗 CD39 还可促进免疫细胞浸润进入“T 细胞贫乏”的肿瘤，并挽救对抗 PD-1 的耐药。

两个实际含义：

1. 只测腺苷水平不足以评价抗 CD39 的作用——还需测 ATP 池、IL-18 释放与炎症小体活化。
2. 阻断 CD39 与阻断 CD73 或 A2AR 有一处机制上的根本差异：阻断 CD39 保留了具免疫刺激作用的 ATP 池，而在 CD73 或 A2AR 处阻断则不保留。这解释了 §3.1 的效果差异，也说明“腺苷通路抑制剂”不能当作一类等效药物看待。

3.3 遗传学证据与模型选择

有研究报告：在 CD39 缺陷小鼠中，抗 PD-1 与抗 CTLA-4 在 B16-F10 中的疗效提高；在对单药抗 PD-1 耐药的 MCA205 肉瘤模型中，次优化疗方案可增强野生型小鼠的抗 PD-1 疗效，而在 CD39 缺陷小鼠中该协同进一步改善，联合治疗几乎挽救了全部动物。

注意 B16-F10 与 MCA205 均为本库已收录或提及的模型（B16 有模型页；MCA205 见抗 CD25 的 Fc 优化记录）。本条为 B16 这个抗性模型提供了一条新的增敏路径。

3.4 CD39 与 CD73 的抗体与剂量记录

本节最大的缺口：小鼠替代抗体在免疫健全同源模型中的具体剂量数值几乎全部缺失。 现有明确剂量（SRF367-A 的 400 µg / 20 mg/kg、21127 的 10 mg/kg）均来自异种移植或人源化体系。MC38 中抗 CD39 与抗 PD-1 相当的那组关键数据，其剂量未在可检索片段中出现。

3.5 Fc 需求：本轮无数据

未检索到腺苷通路任何靶点以恒定区为变量的小鼠体内对比实验。

机制上可作的推论：CD39 与 CD73 均为细胞表面酶，表达于 Treg、TAM 与部分肿瘤细胞。若恒定区具效应功能，可能清除这些细胞——这在 Treg 与 TAM 上或为增益，但本轮无实验数据支持任一方向。有研究以反义寡核苷酸敲低 mCD39 亦达到减少瘤内 Treg 的效果，说明“减少 Treg”可以不依赖 Fc 而由靶点功能本身实现——这使 Fc 的净贡献更难推断。 本页不对腺苷通路的 Fc 方向下结论。

4. 跨模型剂量速查表（VISTA 及归因用抗体）

本表按模型排列。 造模条件与逐条文献见各模型页。

跨模型观察：

• 300 µg/次是本库检查点抗体记录中偏高的一档（常见 100–250 µg/只），且在该实验中五个靶点统一使用。
• VISTA 的剂量以 mg/kg 计（5–10 mg/kg），与 CT26 实验中的 300 µg/只（20 g 小鼠约 15 mg/kg）量级相近。
• 抗 Gr-1 的 12.5 mg/kg 明显高于本库其他记录（4T1 页为 230 µg/只、髓系页为 300 µg/只）。同一支抗体在不同研究中差异可达数倍，跨研究照搬风险高。
• MB49 与 hVISTA 敲入小鼠是本库尚未收录的模型与宿主，可列入后续模型页计划。

5. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

5.1 配套同型对照——本页确认了两个先前待核实的条目

该研究的对照做法值得借用：两支不同种属的实验抗体各配一支对应亚型的对照，且剂量与实验抗体一致（VSTB123 配 C1.18.4 均 10 mg/kg；RB6-8C5 配 LTF-2 均 12.5 mg/kg）。本库累计已记录到五处以生理盐水或载体替代同型对照的做法，本条是正面范例。

6. 使用注意事项小结

1. 抗 VISTA 的抑瘤作用需要效应功能，有配对 Fc 实验证明（§2.1）。
2. MB49 的宿主性别是关键变量（H-Y 抗原在雌鼠中为外来抗原）（§2.2）。
3. CD39 与 CD73 是酶靶点，可用酶活抑制作读数，与本库其他靶点不同（§3）。
4. 同一腺苷通路的三个节点效果不等价：MC38 中抗 CD39 与抗 PD-1 相当，抗 CD73 与 A2AR 抑制剂远不及（§3.1）。
5. 抗 CD39 的机制是 ATP–P2X7–炎症小体–IL-18，不只是减少腺苷；只测腺苷不足以评价其作用（§3.2）。
6. 五靶点头对头的结论来自专利实施例，且申请人是自家靶点的开发方，需打折看待（§1）。
7. 同剂量比较保证公平，却未必让每支抗体处在最优点（§1）。
8. 抗 Gr-1 的剂量在不同研究中差异可达数倍（12.5 mg/kg vs 230 µg/只 vs 300 µg/只）（§4）。
9. C1.18.4（小鼠 IgG2a）与 LTF-2（大鼠 IgG2b）是确认可用的同型对照（§5.1）。
10. 腺苷通路各靶点在免疫健全同源模型中的剂量数值几乎全部缺失（§3.4）。

7. 证据缺口

• 本页所有小鼠靶点的剂量记录均来自专利实施例，未检索到同行评议全文给出完整给药参数（CD73 的 Oleclumab 替代抗体研究除外，但其剂量未在可检索片段中出现）。
• V4、1G9、VSTB 系列均未上市，无法直接采购。
• 腺苷通路（CD39、CD73、A2AR）在免疫健全同源模型中的剂量数值几乎全部缺失；现有明确剂量均来自异种移植或人源化体系（§3.4）。
• 未检索到腺苷通路任何靶点以恒定区为变量的对比实验（§3.5）。
• 2C5、TY/23 的亚型与 SRF367-A、IPH5201 的小鼠替代形式均未检索到可采购来源。
• TY/23 的亚型未检索到。
• VISTA 的小鼠原生克隆（Le Mercier 等 2014 所用）未检索到具体克隆号与货号。
• MB49 与 hVISTA 敲入小鼠尚未建立模型页。
• 本页涉及的 BTLA、TNFR2、CD27、CD70、CD28 等靶点本轮未检索到任何小鼠体内记录。

8. 参考文献

1. Le Mercier I, et al. VISTA regulates the development of protective antitumor immunity. Cancer Res. 2014;74(7):1933-44.（抗小鼠 VISTA 抗体的原始抑瘤报告）
2. Wasiuk A, et al. Cancer Immunol Immunother. 2012;61:2273-82.（MB49 的 H-Y 抗原特性，§2.2）
3. Efficacy and pharmacodynamic effect of anti-CD73 and anti-PD-L1 monoclonal antibodies in combination with cytotoxic therapy: observations from mouse tumor models. PMC10793677.（Oleclumab 小鼠替代抗体；期刊、作者、卷期待补）
4. Targeting CD39 in cancer reveals an extracellular ATP- and inflammasome-driven tumor immunity. Cancer Discov. 2019;9(12):1754.（§3.1 的通路内头对头与 §3.2 的机制；作者待补）
5. Blocking antibodies targeting the CD39/CD73 immunosuppressive pathway unleash immune responses in combination cancer therapies. Cell Rep. 2019. PMID 31116985.（IPH5201 与 IPH5301；§3.3 的遗传学证据）
6. Antisense oligonucleotide targeting CD39 improves anti-tumor T cell immunity. J Immunother Cancer. 2019. doi:10.1186/s40425-019-0545-9.（§3.5 的反义寡核苷酸对照）
7. CD39: a complementary target to immune checkpoints to counteract tumor-mediated immunosuppression. doi:10.1080/2162402X.2014.1003015.（OREG-103/BY40）
8. Newman AM, et al. Nat Methods. 2015;12(5):453-457.（RNA-seq 免疫细胞去卷积方法，本页多处实验所用）
9. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
10. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
11. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
12. 专利出处： US10793637 / US10738128（SRF367-A 抗 CD39）、US11873346 / US10633456（CT26 五靶点头对头与 V4 数据）、US11014987 / US12441801 / US11987630 / US10899836（VSTB123 与 VSTB124 的配对 Fc 实验、MB49 条件、PK 与 ADA 测定）、US12018089 / US11634500（抗 CD73）。各模型的完整文献列表见对应模型页。