抗CD3 / 抗TCR克隆：145-2C11、17A2、H57-597与T细胞衔接器

克隆层：回答“这几支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”；造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。

文献汇编声明：编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处，非推荐剂量。
检索截止 2026-10-19

1. Fc 逻辑是全库第四类：沉默是为了安全，不是为了疗效

前九篇克隆页归纳出三类 Fc 逻辑：阻断型宜沉默（PD-1、VEGF-A）、清除型需效应功能（PD-L1、CTLA-4、CD25、CD8、CD4）、激动型依赖 FcγRIIB 交联（OX40、4-1BB、GITR、CD40、ICOS）。

抗 CD3 是第四类：它的 Fc 结合本身就是毒性来源。

机制很清楚： 145-2C11 是仓鼠抗小鼠 CD3 复合物的单抗，是强效免疫抑制剂；首次给药即触发系统性多种细胞因子释放，这正是该抗体急性毒性的原因。这种细胞激活是 T 淋巴细胞与携带 FcγR 的细胞之间发生交联的结果，而交联的成因是该仓鼠单抗对小鼠 FcγR 的高亲和力。 反复注射还会引发中和性体液应答。

已报告被诱导的细胞因子包括 IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17A。

与激动型抗体对照着看，两者恰好相反： 激动型抗体（OX40、4-1BB）需要 FcγR 交联才能起效；抗 CD3 的 FcγR 交联不是起效机制，而是毒性机制。同一个物理过程，在两类抗体上一个是必需、一个是祸首。

2. 一个全库唯一的结果：沉默 Fc 后毒性、免疫原性都没了，疗效却不变

这是我们上百条记录中唯一一处“改 Fc 只有好处、没有代价”的案例，值得完整引用。

有研究构建了 145-2C11 的嵌合形式并做系统比较：

作者结论：不结合 FcγR 的抗 CD3 单抗在体内保留强效免疫抑制活性，同时不具免疫原性；这种治疗-毒性比的改善在临床移植中可能有益。

对选型的含义：抗 CD3 用效应沉默形式没有任何疗效损失。 这与抗 PD-L1（沉默版 TGI 21% vs 完整版 52%）、抗 CTLA-4（沉默 0/9 vs 增强型 8/8）、激动型（沉默即失活）都不同——在那三类上沉默是有代价的，在抗 CD3 上没有。

2.1 细胞因子释放的剂量-形式关系

有专利实施例做了更细的梯度（静脉单次给药 50 µg，0.5、24、144 小时取血 ELISA）：

三档之间是连续的：Fc 结合能力越低，细胞因子释放越少。 这说明“沉默”不是有无的二元问题——低结合版仍有中度短暂释放，完全无 Fc 才可忽略。

2.2 一个可用的剂量-毒性参照

另有专利记载：1 mg/kg 的 145-2C11 显著升高血清 IL-2、IL-6、TNF-α（1.5 与 4 小时）及 IFN-γ（12 小时）；而同剂量的抗 TCRβ 抗体 H57-597 仅产生低水平的同种细胞因子；即便在 0.1、1、5 mg/kg 三个剂量下，H57-597 引起的血清 IL-2 与 IL-6 均显著更低，IFN-γ 与 TNF-α 不可检出。

结论：以抗 TCR（H57-597）替代抗 CD3（145-2C11）接合 TCR 复合物，细胞因子释放极小。 若实验目的是接合 TCR 而非特意研究细胞因子释放综合征，H57-597 是毒性更低的选择。

反过来，若要建立细胞因子释放综合征（CRS）模型，145-2C11 正是标准工具——已有文献化的 BALB/c 小鼠抗 CD3 诱导 CRS 模型可循。

3. ⚠ 17A2 与 145-2C11 竞争同一位点

供应商资料明确载明：145-2C11 抗体可阻断 17A2 抗体与 CD3ε⁺ T 淋巴细胞的结合。

这是本库记录到的第三对检测/治疗克隆冲突（前两对：RB6-8C5 与 1A8；GK1.5 自身既做清除又做检测）。

实际含义：体内用 145-2C11 处理后，不能用 17A2 做流式检测 T 细胞——信号下降分不清是“T 细胞被清除/调变”还是“表位被占据”。反之亦然。 需要配对时，应改用不与治疗克隆竞争的检测方案（如针对治疗抗体恒定区的二抗共染），或选择已知非竞争的第三个克隆。

两个克隆的识别范围也不同： 17A2 反应于小鼠 CD3 复合物，包括 CD3ε、CD3γ 与 CD3δ；145-2C11 针对 CD3ε 链。17A2 是广泛使用的小鼠 T 细胞表型标记，但由于 CD3ε 链含胞内信号结构域，17A2 结合 CD3 同样可诱导细胞活化——它不是一个“中性”的检测抗体。

4. T 细胞衔接器：沉默 Fc 同时解决毒性与半衰期

把抗 CD3 做进双特异性 T 细胞衔接器时，沉默 Fc 有第二个理由：

• 经典 BiTE 格式（无 Fc）的体内半衰期约 1 小时；
• 带沉默 Fc 的 CD3 重定向分子半衰期可达数周。

有研究构建了全小鼠源的 CD3 × EpCAM 双抗，采用小鼠 IgG2aσ 沉默 Fc 骨架，报告其可将预活化的 OT1 T 细胞重定向杀伤表达人 EpCAM 的 B16F10 细胞，并在处理新鲜分离的 OT1 T 细胞时诱导细胞因子分泌与增殖。

市面上已有同类小鼠替代产品： 有供应商提供全小鼠源的 CD19 × CD3ε 双抗（克隆 1D3 × 145-2C11），骨架为小鼠 IgG2a κ 带 LALA-PG 突变以消除 FcγR 结合与补体激活。其产品说明指出：全小鼠序列加沉默 Fc 使其适用于免疫健全的同源模型，可避免抗药反应与 Fc 介导的混杂因素，从而单独研究衔接器机制本身。

这段供应商表述与本库反复记录的三条 ADA 实测证据完全一致（EMT6 的人源化抗体被迫换成小鼠化版本、EL4 的研究为维持人源抗体暴露而清除 T 细胞、DTA-1 反复给药的过敏反应）。“全小鼠序列 + 沉默 Fc”正在成为小鼠体内双抗的标准配置。

注意这是一个直接的竞品格式参照： 该产品与本库其他双抗（PD-1 × VEGF-A、PD-L1 × VEGF-A、LAG-3 × PD-1）采用的是同一套设计逻辑——全小鼠序列、LALA-PG 沉默骨架、面向免疫健全同源模型。

5. 跨模型剂量速查表

本页克隆在本库各肿瘤模型中的记录很少，多数来自移植免疫、自身免疫与 CRS 模型。

跨模型观察：

• 本页克隆在本库十五个肿瘤模型中几乎没有体内给药记录——它们主要出现在流式检测组合中（53-6.7、GK1.5、17A2 等）。这与其他克隆页正相反：那些克隆的记录集中在肿瘤模型，本页集中在移植免疫与毒理。
• 剂量档明显低于其他克隆：50 µg 单次或 0.1–5 mg/kg，而检查点抗体常用 200–250 µg/只。这与其毒性直接相关，不是效力不足。
• 本页是全库唯一以“细胞因子释放”为主要读数的一组，其他克隆页的读数都是瘤体积或生存期。

6. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

6.1 配套同型对照

衔接器类分子的对照要求比普通双抗更严： 除同型对照双抗与单臂亲本外，还应考虑“一臂无关靶点 + 一臂抗 CD3”的对照，用以区分“重定向杀伤”与“单纯 CD3 接合引起的多克隆活化”。后者本身就会产生细胞因子与肿瘤生长变化。

7. 使用注意事项小结

1. FcγR 结合是毒性来源，不是起效机制（§1）——与激动型抗体恰好相反。
2. 沉默 Fc 无疗效代价（§2）——全库唯一一处“只有好处”的 Fc 改造。
3. 沉默程度是连续的：低结合版仍有中度细胞因子释放，完全无 Fc 才可忽略（§2.1）。
4. 17A2 与 145-2C11 竞争同一位点，不可互为检测与治疗（§3）。
5. 17A2 不是中性检测抗体，其结合本身可诱导 T 细胞活化（§3）。
6. 接合 TCR 而不想要细胞因子释放时，考虑 H57-597（§2.2）。
7. 145-2C11 是建立 CRS 模型的标准工具（§2.2）。
8. 衔接器的沉默 Fc 同时解决毒性与半衰期（无 Fc 约 1 小时 vs 沉默 Fc 数周）（§4）。
9. 剂量档远低于检查点抗体（50 µg 或 0.1–5 mg/kg），因毒性而非效力（§5）。
10. 衔接器实验需要额外的“无关靶点 × CD3”对照（§6.1）。

8. 证据缺口

• 17A2 在本库任何肿瘤模型中的体内剂量记录全部缺失，尽管它是常用克隆。
• 17A2 的亚型与具体货号未检索到。
• H57-597 的亚型、货号与肿瘤模型用法未检索到。
• 本页克隆在肿瘤模型中的记录极少，现有数据集中于移植免疫、自身免疫与毒理模型。
• 未检索到 17A2 与 145-2C11 在体内效应上的直接比较（仅知两者竞争同一位点）。
• §2 的嵌合 IgG3 数据来自 1990 年代研究，须调阅全文核对；未见现代重复。
• 未检索到本页克隆的小鼠化重组形式市售产品（除双抗格式外）。

9. 参考文献

1. Léo O, et al. Proc Natl Acad Sci USA. 1987.（145-2C11 的来源文献；卷期页码待核实）
2. An anti-murine CD3 monoclonal antibody with a low affinity for Fc gamma receptors suppresses transplantation responses while minimizing acute toxicity and immunogenicity. PMID 7636216.（本页 §2 核心文献；期刊、作者、卷期待补）
3. Ferran C, et al. Clin Exp Immunol. 1991;86:537-543.（抗 CD3 诱导 CRS 的模型方法）
4. Ferran C, et al. Eur J Immunol. 1990;20:509-515.（145-2C11 的细胞因子谱）
5. Chornoguz O, Leettola CN, Leander K, Brosnan K, Emmell E, Chiu ML, Santulli-Marotto S. Characterization of a novel bispecific antibody that activates T cells in vitro and slows tumor growth in vivo. 2019. doi:10.1089/mab.2019.0035.（全小鼠 CD3 × EpCAM 沉默 Fc 双抗）
6. Cole MS, Anasetti C, Tso JY. Human IgG2 variants of chimeric anti-CD3 are nonmitogenic to T cells. J Immunol. 1997;159(7):3613-21.
7. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
8. Lo M, et al. J Biol Chem. 2017;292(9):3900-3908.（LALA-PG 在小鼠中的沉默效果）
9. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.专利出处： US10329350（145IgG-AA 与 Fab 三聚体的细胞因子梯度）、US9018006（H57-597 与 145-2C11 的细胞因子对比）、US11833152 / US11103510（CRS 模型方法）。各模型的完整文献列表见对应模型页。