抗小鼠CTLA-4克隆9D9选型与剂量考证：Treg清除机制与恒定区抉择

克隆层文档：本页回答“这支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”；造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。

文献汇编声明：编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处，非推荐剂量。
版本 1.0 ｜ 检索截止 2026-09-13 ｜ 证据分级：◆ 同行评议 ｜ ○ 专利实施例

1. 抗小鼠CTLA-4克隆9D9概述：一支“小鼠抗小鼠”的抗体

9D9 是抗小鼠 CTLA-4（CD152）单克隆抗体，来源见 Quezada 等 2006。

它与本站其他克隆有一个根本区别：9D9 是小鼠单克隆抗体，原生恒定区为小鼠 IgG2b，不是大鼠或仓鼠来源。

这个区别有两个实际后果：

1. 免疫原性风险低得多。 本站反复记录的“异种序列在免疫健全小鼠中引发抗药反应”问题（RMP1-14 的大鼠 IgG2a、DTA-1 的大鼠 IgG2b、人源化抗体的抗种属反应），在 9D9 上基本不存在——它本来就是小鼠序列。长疗程实验中这是实质优势。
2. 同型对照必须用小鼠 IgG2b，不能用大鼠 IgG。 与抗 PD-1 联合时，两支抗体各需一支不同种属的对照（见 §5.3）。

作用机制不是单纯阻断。 多个来源载明：9D9 在体内通过清除瘤内调节性 T 细胞（Treg）起作用，同时也有 CTLA-4 中和活性。这决定了它的 Fc 效应功能方向——见 §2。

2. 本页核心：效应功能的强度决定成败，而不只是有无

抗 CTLA-4 的疗效依赖 Fc 介导的瘤内 Treg 清除，这一点本站多处记录。但 9D9 提供了一组更进一步的数据：效应功能不是有无的二元问题，而是有剂量-效应关系的。

2.1 一组三档对比（CT26 模型）

有专利实施例在 CT26 荷瘤小鼠中，用同一 9D9 可变区配三种不同效应强度的恒定区：

从沉默到野生型到增强，完全缓解率是 0/9 → 3/9 → 8/8。

这是本汇编收集到的最干净的一组 Fc 效应功能数据。 它同时说明三件事：

• 抗 CTLA-4 的疗效几乎完全依赖效应功能（沉默版零缓解）；
• 野生型 mIgG2a 并未用尽该机制的上限（3/9）；
• ADCC 增强型可把疗效推到全部缓解——这意味着“选对亚型”只是起点，Fc 工程还有可利用的空间。

2.2 原生 IgG2b 的活性偏低——这是本克隆最需要知道的一条

有供应商资料明确指出：9D9 与市面上大多数抗小鼠 CTLA-4 单抗一样采用 IgG2b 亚型，而该亚型在体内表现出低抗肿瘤活性（援引 Selby 等）；为克服这一点，以重组技术制备了具小鼠 IgG2a 亚型的版本，后者介导更强的细胞毒功能。

本站模型页也有对应记录：有专利实施例在 MC38 与 Colon-26 中直接比较 9D9 的 mIgG2a 与 mIgG2b 版本，mIgG2a 版可根除已成瘤的 Colon-26、部分抑制 MC38，mIgG2b 版无效。

实际含义：Bio X Cell 的 BE0164 / BP0164 是原生 mIgG2b 形式（见 §5.1）。若实验目的是获得最强的抗肿瘤效应，原生形式不是最优选择——应使用 mIgG2a 版本。文献中大量使用原生 IgG2b 版的研究，其效应量可能系统性偏低。

2.3 与其他靶点的方向对照

3. 三个抗 CTLA-4 克隆的分工——不要混用

本站各模型页出现过三个抗小鼠 CTLA-4 克隆，机制与种属都不同：

三点必须注意：

1. 同型对照要跟着换种属：9D9 配小鼠 IgG2b，9H10 配叙利亚仓鼠 IgG，UC10-4F10-11 配亚美尼亚仓鼠 IgG。三者不能互相替代。
2. 9H10 与 9D9 都清除 Treg，但 9H10 的机制描述侧重“阻断配体、恢复 CD28 共刺激”。若研究问题涉及共刺激通路的恢复，两者不等价。
3. 本站 LLC 模型页中的抗 CTLA-4 用的是 9H10（降量方案：首剂 100 µg，后两剂各 50 µg），而 MC38、B16、GL261 多用 9D9。跨模型引用时必须核对克隆号。

4. 抗小鼠CTLA-4克隆9D9：恒定区形式与品系匹配

本克隆的品系考虑与其他克隆不同。 9D9 原生即为小鼠 IgG2b，而小鼠 IgG2b 在 Igh1-a 与 Igh1-b 两个单倍型间不像 IgG2a/IgG2c 那样存在等位替换关系。但一旦改为 IgG2a 版本，同种异体问题就出现了：

一处形式空缺： 市售的 9D9 增强型均为 mIgG2a 恒定区（见 §5.1），而本站九个模型属 C57BL/6 背景，其同源形式是 IgG2c。未检索到 9D9 的 mIgG2c 版本。由于本克隆需要效应功能、不加沉默突变，IgG2a 与 IgG2c 的差异在此不仅涉及免疫原性，还可能涉及与不同 FcγR 的结合特性——这一点本轮未检索到直接比较数据，属证据缺口。

可用的恒定区形式：

5. 抗小鼠CTLA-4抗体(9D9): 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

5.1 9D9 各形式

CP007 与 CP008 是一对设计得很好的配套产品：同一可变区、同为 mIgG2a 恒定区，唯一差别是 CP008 带 LALA-PG。这正是 §2 所需的机制对照配对——用它们做实验，可以直接回答“疗效有多少来自 Treg 清除”。

5.2 其他抗 CTLA-4 克隆

Bio X Cell 亦提供上述三个克隆的重组嵌合版本（RecombiMAb），以小鼠恒定区替换原生大鼠或仓鼠恒定区，以降低在敏感小鼠模型中的免疫原性。

5.3 配套同型对照

配对规则：对照须与实验组在亚型、种属、形式、Fc 突变、缓冲液、内毒素规格上一致。

与抗 PD-1 联合时需要两支对照： 抗 PD-1（大鼠 IgG2a）配 2A3，9D9（小鼠 IgG2b）配小鼠 IgG2b。本站 GL261 与 B16 模型页均有按种属分别配对的范例。

5.4 抗小鼠CTLA-4抗体(9D9)跨模型剂量速查表

本表按模型排列。 造模条件与逐条文献见各模型页——剂量不能脱离造模条件解读。

跨模型观察：

• 收敛值为 100–200 µg/只，或 10 mg/kg。 与抗 PD-1 的常用区间相近，但注意 B16 与 GL261 都用 100 µg/只，低于同实验中抗 PD-1 的 250 µg——联合方案中两支抗体的剂量常不相等，照抄时不要统一。
• 多数记录未注明所用的是 mIgG2b 原生形式还是 mIgG2a 版本。 考虑到 §2.2 的效应量差异，这是引用本克隆剂量时最需要核实的一项。

6. 使用注意事项小结

1. 原生 mIgG2b 活性偏低，追求效应量应用 mIgG2a 版本（§2.2）。
2. 效应功能有剂量-效应关系，ADCC 增强型可把 CT26 的完全缓解率推到 8/8（§2.1）。
3. 9D9 是小鼠源抗体，免疫原性风险低于大鼠/仓鼠源克隆（§1）——长疗程实验中的实质优势。
4. 同型对照用小鼠 IgG2b（原生）或小鼠 IgG2a（改造版），不能用大鼠 IgG（§5.3）。
5. 9D9、9H10、UC10-4F10-11 机制与种属都不同，不可混用，对照也要跟着换（§3）。
6. CP007 与 CP008 是现成的机制对照配对（§5.1）。
7. C57BL/6 系模型缺 mIgG2c 形式（§4 形式空缺）。
8. 引用剂量前先核实该研究用的是哪一种恒定区形式（§5.4）。

7. 证据缺口

• 多数文献未注明所用 9D9 是 mIgG2b 还是 mIgG2a 形式，这直接影响效应量的可比性。
• 未检索到 9D9 的 mIgG2c 版本市售产品，而九个模型属 C57BL/6 背景（§4）。
• 未检索到 mIgG2a 与 mIgG2c 在 FcγR 结合与 Treg 清除效力上的直接比较数据。
• ADCC 增强型（S239D/A330L/I332E）无市售产品，§2.1 的数据来自专利实施例，未见同行评议来源重复。
• §2.1 与 §2.2 的关键数据均来自专利实施例或供应商资料，同行评议的原始文献（Selby 等、Quezada 等、Simpson 等）须调阅全文核对。
• 未检索到本克隆的靶点结合确认或暴露量测定方法学文献。

8. 参考文献

以下原始文献均须调阅全文核对卷期页码。

1. Quezada SA, et al. 2006.（9D9 的来源文献）
2. Selby MJ, et al. Anti-CTLA-4 antibodies of IgG2a isotype enhance antitumor activity through reduction of intratumoral regulatory T cells. Cancer Immunol Res. 2013.（IgG2a 优于 IgG2b 的依据）
3. Simpson TR, et al. 2013.（9H10 与 9D9 的 Treg 清除效力比较）
4. Krummel MF, Allison JP. 1995.（9H10 的来源文献）
5. Walunas TL, et al. 1994.（UC10-4F10-11 的来源文献）
6. Dahan R, et al. FcγRs modulate the anti-tumor activity of antibodies targeting the PD-1/PD-L1 axis. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.（Fc 主线）
7. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.（品系与恒定区）
8. Lo M, et al. J Biol Chem. 2017;292(9):3900-3908.（LALA-PG 在小鼠中的沉默效果）
9. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
10. 专利出处： US12246066（CT26 中三档 Fc 变体的完全缓解率）、US10532096 / US9968674（MC38 与 Colon-26 的 mIgG2a vs mIgG2b 对比）、US8383796 同族、US11376272。各模型的完整文献列表见对应模型页。