《小鼠体内功能抗体文献汇编——有关疾病、模型和抗体克隆的实验条件》

细胞因子与可溶性靶点克隆:TGF-β(1D11)、LAP(28G11/16B4)、IFN-γ(XMG1.2)

细胞因子与可溶性靶点克隆:TGF-β(1D11)、LAP(28G11/16B4)、IFN-γ(XMG1.2)等

克隆层:本页回答“这几支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”;造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。

文献汇编声明:编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处,非推荐剂量。
检索截止 2026-10-19

1. 可溶性靶点的 Fc 逻辑:通常无关,但有一个重要例外

中和可溶性细胞因子的抗体没有靶细胞可清除,因此效应功能不提供疗效贡献——这与抗 VEGF-A 的判断一致(见抗 VEGF-A 克隆页 §2)。

但 TGF-β 是个例外,而且例外的方式很具体。

TGF-β1 以长前体多肽形式合成,切割后产生成熟蛋白与潜伏相关肽(LAP)。因此同一条通路上存在两类性质不同的靶点:

表 1 TGF-β 通路不同靶点形式及其 Fc 效应功能逻辑对照
靶点形式 存在方式 Fc 效应功能
成熟 TGF-β1/2/3 可溶性 无靶细胞可清除——效应功能无益
LAP / 潜伏型 TGF-β1 部分以膜结合形式存在于 Treg 等细胞表面 存在靶细胞——效应功能理论上可清除这些细胞

实际含义:抗 TGF-β 与抗 LAP 不是同一类抗体。 前者是纯中和,后者可能兼有细胞靶向。本轮未检索到抗 LAP 以恒定区为变量的对比实验,因此这一层区分目前是机制推论。 但本库已有一条相关旁证: 有抗 LAP 研究同时设了小鼠 IgG1 与小鼠 IgG2a 两种同型对照(见 §2),暗示其实验设计已考虑到不同效应强度的背景差异。

本库 Fc 方向汇总更新:
可溶性细胞因子(TGF-β 成熟体、IFN-γ、IL-12):效应功能无益 | LAP / 潜伏型 TGF-β:存在膜结合形式,方向未定。

2. 本页最干净的一组数据:同一靶点,两支抗体,一支有效一支无效

有专利实施例在 4T1 肺转移模型中平行比较了两支抗 LAP 抗体:

表 2 4T1 肺转移模型中抗 LAP 抗体与抗 TGF-β 抗体头对头疗效实验设计
项目 内容与具体参数
造模 1×10⁵ 4T1 细胞接种乳腺脂肪垫;BALB/c 6–8 周
分组 接种后第 1 天随机,每组 7 只
受试抗体 抗 TGF-β 克隆 1D11-IgG1;抗 LAP 克隆 28G11;抗 LAP 克隆 16B4
对照 小鼠 IgG1 同型对照 与 小鼠 IgG2a 同型对照(两支)
剂量 各 10 mg/kg,腹腔,D0、3、6、9、12
读数 D29 处死,计数肺转移结节

结果:抗 TGF-β 1D11 与抗 LAP 28G11 均显著减少肺转移结节,而抗 LAP 16B4 没有。

作者结论:两支抗 LAP 抗体具有不同的功能效应;28G11 与抗 TGF-β 1D11 效力相当,与“28G11 的作用来自 TGF-β 通路”这一解释一致。

这是本库中“同一靶点、不同克隆、结果相反”最干净的一组数据。 本库此前记录的同类情形是 RMP1-14 与 29F.1A12(同靶点、同亚型、亲和力差 100 倍但都有效)与 RMP1-30(同靶点但为激动型、不阻断配体)。本条更进一步:两支抗体都结合 LAP,功能却一有一无。

实际含义与推广价值: 靶点名称不足以预测功能。 选抗 LAP 抗体时,“抗 LAP”这个标签不携带任何效力信息——必须看具体克隆的功能验证数据。在没有克隆间比较数据的靶点上(本库多数如此),不能默认“同靶点抗体效力相当”。

3. 给药路径与剂量方案:本页有两个值得注意的做法

3.1 首剂静脉、后续腹腔

本页多条记录采用首剂静脉注射、其后改腹腔的方式(抗 TGF-β 1D11、抗潜伏型 TGF-β1、抗 PD-L1 6E11 等)。

本库其他页几乎全部为单一途径给药。 首剂走静脉通常是为快速达到全身暴露,后续腹腔则便于长期操作。引用这类方案时不要简化为“腹腔给药”。

3.2 负荷剂量 + 维持剂量

本页见到多条降量方案:抗 PD-L1(10F.9G2 或 6E11)首剂 10 mg/kg、其后 5 mg/kg;抗 GP120 同型对照首剂 20 mg/kg、其后 15 mg/kg。

这是本库第三类出现降量方案的场合(前两处:LLC 的 9H10 首剂 100 µg 后各 50 µg;E0771 的 20D5 首剂 200 µg 后各 100 µg)。 注意此处连同型对照也用了降量方案,与实验组保持一致——这是对照匹配做得细致的表现,本库多数研究的对照为固定剂量。

4. 跨模型剂量速查表

表 3 细胞因子及可溶性靶点相关抗体跨模型剂量与造模条件速查表
模型 靶点 / 克隆 剂量 频次 / 途径 造模条件 / 结果说明 证据
4T1 肺转移 TGF-β / 1D11-IgG1 10 mg/kg D0、3、6、9、12,腹腔 1×10⁵ 乳腺脂肪垫;D1 随机;每组 7 只;D29 数肺结节 ○
4T1 肺转移 LAP / 28G11(有效)与 16B4(无效) 各 10 mg/kg 同上 同上 ○
EMT6 潜伏型 TGF-β1 / hT0947AE07-SG191 10 或 30 mg/kg 每周 3 次 × 2 周;首剂静脉,其后腹腔 1×10⁵ 细胞注入左侧第 5 乳腺脂肪垫,HBSS:Matrigel 1:1;100–300 mm³(D7)随机;载体为 150 mM NaCl / 20 mM His-HCl pH 6.0 ○
EMT6(同实验) PD-L1 / 10F.9G2(大鼠 IgG2b,BioXcell) 首剂 10 mg/kg,其后 5 mg/kg 同上 同上 ○
某皮下模型 TGF-β / 1D11(小鼠 IgG1) 10 mg/kg 每周 3 次 × 3 周;首剂静脉,其后腹腔 50–180 mm³(约 D12)按瘤体积分组;瘤体积按 ½×(长×宽²) ○
同上 PD-L1 / 6E11(小鼠 IgG1) 首剂 10 mg/kg,其后 5 mg/kg 同上 对照为抗 GP120(小鼠 IgG1 克隆 10E7),首剂 20 mg/kg、其后 15 mg/kg ○
4T1 / CT26 / B16-F10(静脉接种) TGFβRII / MT1 40 mg/kg 每周 3 次,接种后 24 小时起 抑制肺转移:4T1 84%、CT26 94%、B16-F10 63% ○
EMT6 皮下 TGFβRII / MT1 40 mg/kg 每周 3 次,成瘤后 原发瘤抑制 28%;自发肺转移抑制 84% ○
CT26 IL-12p75 / R2-9A5 见原文 见原文 中和用途 ◆
非本库模型 IFN-γ / XMG1.2 0.5 mg/只 同抗 CD8α 的时间表 见原文 ○
4T1 LIF / 抗 LIF 见原文 见原文 单用及与多柔比星联用 ◆

跨模型观察:

  • TGFβRII(MT1)的 40 mg/kg 是本页最高剂量,与血管生成靶点档(DC101 的 20–40 mg/kg)相当,远高于检查点抗体(5–12.5 mg/kg)。
  • MT1 对原发瘤与转移的效果差异极大:EMT6 皮下模型中原发瘤仅抑制 28%,而自发肺转移抑制 84%。只测原发瘤会严重低估该靶点的作用——这与 4T1 模型页“不做转移读数就不必用 4T1”的结论一致。
  • TGF-β 通路上的三类靶点剂量档不同:成熟 TGF-β(1D11)10 mg/kg、潜伏型 TGF-β1 10–30 mg/kg、TGFβRII(MT1)40 mg/kg。同一通路不可照搬剂量。
  • 1D11 是跨种属抗体:识别人、小鼠、大鼠、仓鼠、犬与非人灵长类的 TGF-β1、2、3。这意味着它在异种移植与同源模型中都能用,与抗 VEGF-A 的 B20/G6 谱系同理(见抗 VEGF-A 克隆页 §1)。

5. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表

表 4 细胞因子与可溶性靶点相关克隆与 Bio X Cell / Syd Labs 货号对照
靶点 克隆 Isotype / Fc 特异性 Bio X Cell 货号 Syd Labs 货号
IFN-γ XMG1.2 大鼠 IgG1 κ 小鼠 IFN-γ BE0055 / BP0055 未见
TGF-β1/2/3 1D11.16.8 小鼠 IgG1 κ 跨种属:人、小鼠、大鼠、仓鼠、犬、非人灵长类 BE0057 / BP0057 PA007512.m1
LAP 28G11 待核实 — 未见 未见
LAP 16B4 待核实 — 未见 未见
潜伏型 TGF-β1 hT0947AE07-SG191 待核实 跨种属 未见 未见
TGFβRII MT1 待核实 — 未见 未见
TGF-β 2G7 待核实 — 未见 未见
TGF-β Ab1 待核实 — 未见 未见
IL-12p75 R2-9A5 待核实 — BE0233 未见
LIF 抗 LIF 待核实 — 未见 未见
IL-10 见 MC38 模型页 待核实 — 未见 未见
PD-L1 6E11 小鼠 IgG1 — 未见 未见
PD-L1 10F.9G2 大鼠 IgG2b κ — BE0101 / BP0101 PA007164.r2b
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG2c LALA-PG κ — 未见 PA007164.m2cLA
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG2a LALA-PG κ — CP154 PA007164.m2aLA
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG1 D265A κ — CP001 PA007164.m1DA
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG2a κ — CP158 PA007164.m2a
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG2b κ — 未见 PA007164.m2b
PD-L1 10F.9G2 小鼠 IgG1 κ — CP168 PA007164.m1
PD-L1 10F.9G2 兔 IgG — 未见 PA007164.rt

5.1 配套同型对照

表 5 配套同型对照与降量方案对照匹配列表
配用于 对照说明与克隆 Bio X Cell 货号 Syd Labs 货号
小鼠 IgG1 形式(1D11-IgG1、6E11) 小鼠 IgG1;本页所见为抗 GP120 克隆 10E7 BE0083 / BP0083 PA007126
小鼠 IgG2a 形式 小鼠 IgG2a(如 C1.18.4) BE0085 / BP0085 PA007129
大鼠 IgG2b 形式(10F.9G2) 大鼠 IgG2b(如 LTF-2) BE0090 / BP0090 PA007144
mIgG2c LALA-PG 形式 同恒定区、同突变 未见 PA007141
mIgG2a LALA-PG 形式 同恒定区、同突变 CP048 PA007138
小鼠 IgG1 D265A 形式 小鼠 IgG1 D265A CP047 PA007135
小鼠 IgG2a 形式 小鼠 IgG2a BE0085 / BP0085 PA007129
小鼠 IgG2b 形式 小鼠 IgG2b BE0086 / BP0086 PA007130
降量方案的实验组 对照亦须采用同样的降量方案(§3.2) — —

正面范例说明: 本页记录到一个值得借用的对照做法——同一实验同时设小鼠 IgG1 与小鼠 IgG2a 两支同型对照(4T1 抗 LAP 实验)。当实验组含不同亚型的抗体时,单一对照无法覆盖——本库累计已在五个模型中见到以生理盐水替代对照的做法,本条是正面范例。

6. 使用注意事项小结

  1. 可溶性细胞因子靶点的效应功能无益;但 LAP / 潜伏型 TGF-β 有膜结合形式,方向未定(§1)。
  2. “抗 LAP”这个标签不携带效力信息——28G11 有效、16B4 无效(§2)。同靶点不同克隆的功能可以相反。
  3. TGF-β 通路三类靶点的剂量档不同:成熟体 10 mg/kg、潜伏型 10–30 mg/kg、受体 40 mg/kg(§4)。
  4. 首剂静脉、后续腹腔是本页多条记录的给药方式,不要简化为单一途径(§3.1)。
  5. 降量方案(负荷 + 维持)常见,且对照亦应同步降量(§3.2)。
  6. 只测原发瘤会严重低估 TGFβRII 的作用(EMT6 中原发瘤 28% vs 肺转移 84%)(§4)。
  7. 1D11 是跨种属抗体,在异种移植与同源模型中均可用(§4)。
  8. 同一实验含不同亚型抗体时,须设多支同型对照(§5.1)。

7. 证据缺口

  • 未检索到本页任何靶点以恒定区为变量的对比实验——§1 的 Fc 判断为机制推论。
  • 28G11 与 16B4 的功能差异原因未见说明(表位?亲和力?对潜伏复合物活化的影响?)——这是本页最值得追的一条。
  • 28G11、16B4、hT0947AE07-SG191、MT1、Ab1 均未上市,无法直接采购。
  • 1D11、XMG1.2、R2-9A5 的亚型未全部检索到。
  • 本页绝大多数剂量记录来自专利实施例,同行评议来源仅见于 CT26 与 4T1 的少数条目。
  • IL-12p75(R2-9A5)、LIF、IL-10 的具体剂量数值缺失。
  • 未检索到本页克隆的 ADA 数据、靶点结合确认或暴露量测定。

8. 参考文献

  1. Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.(Fc 主线)
  2. Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.(品系与恒定区)
  3. Liang WC, et al. J Biol Chem. 2006;281(2):951-961.(跨种属抗体的价值,可与 1D11 对照阅读)
  4. Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
  5. 专利出处: US11130802 / US11230601(抗 LAP 28G11 与 16B4 在 4T1 中的头对头)、US11312767 / US12371483(抗潜伏型 TGF-β1 在 EMT6 中的方案)、US11881286(1D11 与 6E11 的联合方案及降量对照)、US8147834(TGFβRII 的 MT1 与 TGF1)。
  6. 供应商资料(◇ 级): Bio X Cell、Invitrogen / eBioscience、Cytek Biosciences。各模型的完整文献列表见对应模型页。

提示: 我们整理了总册《小鼠体内功能抗体文献汇编》,并依据疾病、模型和抗体克隆号三个维度整理了对应章节的单独文件,便于用户查阅和打印。用户可以根据需要索取总册文件和章节的单独文件。我们会根据相关领域研究进展适时更新内容;注册用户可及时收到最新版本。