细胞因子与可溶性靶点克隆:TGF-β(1D11)、LAP(28G11/16B4)、IFN-γ(XMG1.2)
细胞因子与可溶性靶点克隆:TGF-β(1D11)、LAP(28G11/16B4)、IFN-γ(XMG1.2)等
克隆层:本页回答“这几支抗体该怎么选、在各模型里大家用多少”;造模步骤、对照设置与逐条文献见各模型页。
文献汇编声明:编纂方无自有实验数据。所有数值均为文献或专利实施例报告值并标注出处,非推荐剂量。
检索截止 2026-10-19
1. 可溶性靶点的 Fc 逻辑:通常无关,但有一个重要例外
中和可溶性细胞因子的抗体没有靶细胞可清除,因此效应功能不提供疗效贡献——这与抗 VEGF-A 的判断一致(见抗 VEGF-A 克隆页 §2)。
但 TGF-β 是个例外,而且例外的方式很具体。
TGF-β1 以长前体多肽形式合成,切割后产生成熟蛋白与潜伏相关肽(LAP)。因此同一条通路上存在两类性质不同的靶点:
| 靶点形式 | 存在方式 | Fc 效应功能 |
|---|---|---|
| 成熟 TGF-β1/2/3 | 可溶性 | 无靶细胞可清除——效应功能无益 |
| LAP / 潜伏型 TGF-β1 | 部分以膜结合形式存在于 Treg 等细胞表面 | 存在靶细胞——效应功能理论上可清除这些细胞 |
实际含义:抗 TGF-β 与抗 LAP 不是同一类抗体。 前者是纯中和,后者可能兼有细胞靶向。本轮未检索到抗 LAP 以恒定区为变量的对比实验,因此这一层区分目前是机制推论。 但本库已有一条相关旁证: 有抗 LAP 研究同时设了小鼠 IgG1 与小鼠 IgG2a 两种同型对照(见 §2),暗示其实验设计已考虑到不同效应强度的背景差异。
本库 Fc 方向汇总更新:
可溶性细胞因子(TGF-β 成熟体、IFN-γ、IL-12):效应功能无益 | LAP / 潜伏型 TGF-β:存在膜结合形式,方向未定。
2. 本页最干净的一组数据:同一靶点,两支抗体,一支有效一支无效
有专利实施例在 4T1 肺转移模型中平行比较了两支抗 LAP 抗体:
| 项目 | 内容与具体参数 |
|---|---|
| 造模 | 1×10⁵ 4T1 细胞接种乳腺脂肪垫;BALB/c 6–8 周 |
| 分组 | 接种后第 1 天随机,每组 7 只 |
| 受试抗体 | 抗 TGF-β 克隆 1D11-IgG1;抗 LAP 克隆 28G11;抗 LAP 克隆 16B4 |
| 对照 | 小鼠 IgG1 同型对照 与 小鼠 IgG2a 同型对照(两支) |
| 剂量 | 各 10 mg/kg,腹腔,D0、3、6、9、12 |
| 读数 | D29 处死,计数肺转移结节 |
结果:抗 TGF-β 1D11 与抗 LAP 28G11 均显著减少肺转移结节,而抗 LAP 16B4 没有。
作者结论:两支抗 LAP 抗体具有不同的功能效应;28G11 与抗 TGF-β 1D11 效力相当,与“28G11 的作用来自 TGF-β 通路”这一解释一致。
这是本库中“同一靶点、不同克隆、结果相反”最干净的一组数据。 本库此前记录的同类情形是 RMP1-14 与 29F.1A12(同靶点、同亚型、亲和力差 100 倍但都有效)与 RMP1-30(同靶点但为激动型、不阻断配体)。本条更进一步:两支抗体都结合 LAP,功能却一有一无。
实际含义与推广价值: 靶点名称不足以预测功能。 选抗 LAP 抗体时,“抗 LAP”这个标签不携带任何效力信息——必须看具体克隆的功能验证数据。在没有克隆间比较数据的靶点上(本库多数如此),不能默认“同靶点抗体效力相当”。
3. 给药路径与剂量方案:本页有两个值得注意的做法
3.1 首剂静脉、后续腹腔
本页多条记录采用首剂静脉注射、其后改腹腔的方式(抗 TGF-β 1D11、抗潜伏型 TGF-β1、抗 PD-L1 6E11 等)。
本库其他页几乎全部为单一途径给药。 首剂走静脉通常是为快速达到全身暴露,后续腹腔则便于长期操作。引用这类方案时不要简化为“腹腔给药”。
3.2 负荷剂量 + 维持剂量
本页见到多条降量方案:抗 PD-L1(10F.9G2 或 6E11)首剂 10 mg/kg、其后 5 mg/kg;抗 GP120 同型对照首剂 20 mg/kg、其后 15 mg/kg。
这是本库第三类出现降量方案的场合(前两处:LLC 的 9H10 首剂 100 µg 后各 50 µg;E0771 的 20D5 首剂 200 µg 后各 100 µg)。 注意此处连同型对照也用了降量方案,与实验组保持一致——这是对照匹配做得细致的表现,本库多数研究的对照为固定剂量。
4. 跨模型剂量速查表
| 模型 | 靶点 / 克隆 | 剂量 | 频次 / 途径 | 造模条件 / 结果说明 | 证据 |
|---|---|---|---|---|---|
| 4T1 肺转移 | TGF-β / 1D11-IgG1 | 10 mg/kg | D0、3、6、9、12,腹腔 | 1×10⁵ 乳腺脂肪垫;D1 随机;每组 7 只;D29 数肺结节 | ○ |
| 4T1 肺转移 | LAP / 28G11(有效)与 16B4(无效) | 各 10 mg/kg | 同上 | 同上 | ○ |
| EMT6 | 潜伏型 TGF-β1 / hT0947AE07-SG191 | 10 或 30 mg/kg | 每周 3 次 × 2 周;首剂静脉,其后腹腔 | 1×10⁵ 细胞注入左侧第 5 乳腺脂肪垫,HBSS:Matrigel 1:1;100–300 mm³(D7)随机;载体为 150 mM NaCl / 20 mM His-HCl pH 6.0 | ○ |
| EMT6(同实验) | PD-L1 / 10F.9G2(大鼠 IgG2b,BioXcell) | 首剂 10 mg/kg,其后 5 mg/kg | 同上 | 同上 | ○ |
| 某皮下模型 | TGF-β / 1D11(小鼠 IgG1) | 10 mg/kg | 每周 3 次 × 3 周;首剂静脉,其后腹腔 | 50–180 mm³(约 D12)按瘤体积分组;瘤体积按 ½×(长×宽²) | ○ |
| 同上 | PD-L1 / 6E11(小鼠 IgG1) | 首剂 10 mg/kg,其后 5 mg/kg | 同上 | 对照为抗 GP120(小鼠 IgG1 克隆 10E7),首剂 20 mg/kg、其后 15 mg/kg | ○ |
| 4T1 / CT26 / B16-F10(静脉接种) | TGFβRII / MT1 | 40 mg/kg | 每周 3 次,接种后 24 小时起 | 抑制肺转移:4T1 84%、CT26 94%、B16-F10 63% | ○ |
| EMT6 皮下 | TGFβRII / MT1 | 40 mg/kg | 每周 3 次,成瘤后 | 原发瘤抑制 28%;自发肺转移抑制 84% | ○ |
| CT26 | IL-12p75 / R2-9A5 | 见原文 | 见原文 | 中和用途 | ◆ |
| 非本库模型 | IFN-γ / XMG1.2 | 0.5 mg/只 | 同抗 CD8α 的时间表 | 见原文 | ○ |
| 4T1 | LIF / 抗 LIF | 见原文 | 见原文 | 单用及与多柔比星联用 | ◆ |
跨模型观察:
- TGFβRII(MT1)的 40 mg/kg 是本页最高剂量,与血管生成靶点档(DC101 的 20–40 mg/kg)相当,远高于检查点抗体(5–12.5 mg/kg)。
- MT1 对原发瘤与转移的效果差异极大:EMT6 皮下模型中原发瘤仅抑制 28%,而自发肺转移抑制 84%。只测原发瘤会严重低估该靶点的作用——这与 4T1 模型页“不做转移读数就不必用 4T1”的结论一致。
- TGF-β 通路上的三类靶点剂量档不同:成熟 TGF-β(1D11)10 mg/kg、潜伏型 TGF-β1 10–30 mg/kg、TGFβRII(MT1)40 mg/kg。同一通路不可照搬剂量。
- 1D11 是跨种属抗体:识别人、小鼠、大鼠、仓鼠、犬与非人灵长类的 TGF-β1、2、3。这意味着它在异种移植与同源模型中都能用,与抗 VEGF-A 的 B20/G6 谱系同理(见抗 VEGF-A 克隆页 §1)。
5. 抗体 · 亚型 · 供应商货号对照表
| 靶点 | 克隆 | Isotype / Fc | 特异性 | Bio X Cell 货号 | Syd Labs 货号 |
|---|---|---|---|---|---|
| IFN-γ | XMG1.2 | 大鼠 IgG1 κ | 小鼠 IFN-γ | BE0055 / BP0055 | 未见 |
| TGF-β1/2/3 | 1D11.16.8 | 小鼠 IgG1 κ | 跨种属:人、小鼠、大鼠、仓鼠、犬、非人灵长类 | BE0057 / BP0057 | PA007512.m1 |
| LAP | 28G11 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| LAP | 16B4 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| 潜伏型 TGF-β1 | hT0947AE07-SG191 | 待核实 | 跨种属 | 未见 | 未见 |
| TGFβRII | MT1 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| TGF-β | 2G7 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| TGF-β | Ab1 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| IL-12p75 | R2-9A5 | 待核实 | — | BE0233 | 未见 |
| LIF | 抗 LIF | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| IL-10 | 见 MC38 模型页 | 待核实 | — | 未见 | 未见 |
| PD-L1 | 6E11 | 小鼠 IgG1 | — | 未见 | 未见 |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 大鼠 IgG2b κ | — | BE0101 / BP0101 | PA007164.r2b |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG2c LALA-PG κ | — | 未见 | PA007164.m2cLA |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG2a LALA-PG κ | — | CP154 | PA007164.m2aLA |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG1 D265A κ | — | CP001 | PA007164.m1DA |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG2a κ | — | CP158 | PA007164.m2a |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG2b κ | — | 未见 | PA007164.m2b |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 小鼠 IgG1 κ | — | CP168 | PA007164.m1 |
| PD-L1 | 10F.9G2 | 兔 IgG | — | 未见 | PA007164.rt |
5.1 配套同型对照
| 配用于 | 对照说明与克隆 | Bio X Cell 货号 | Syd Labs 货号 |
|---|---|---|---|
| 小鼠 IgG1 形式(1D11-IgG1、6E11) | 小鼠 IgG1;本页所见为抗 GP120 克隆 10E7 | BE0083 / BP0083 | PA007126 |
| 小鼠 IgG2a 形式 | 小鼠 IgG2a(如 C1.18.4) | BE0085 / BP0085 | PA007129 |
| 大鼠 IgG2b 形式(10F.9G2) | 大鼠 IgG2b(如 LTF-2) | BE0090 / BP0090 | PA007144 |
| mIgG2c LALA-PG 形式 | 同恒定区、同突变 | 未见 | PA007141 |
| mIgG2a LALA-PG 形式 | 同恒定区、同突变 | CP048 | PA007138 |
| 小鼠 IgG1 D265A 形式 | 小鼠 IgG1 D265A | CP047 | PA007135 |
| 小鼠 IgG2a 形式 | 小鼠 IgG2a | BE0085 / BP0085 | PA007129 |
| 小鼠 IgG2b 形式 | 小鼠 IgG2b | BE0086 / BP0086 | PA007130 |
| 降量方案的实验组 | 对照亦须采用同样的降量方案(§3.2) | — | — |
正面范例说明: 本页记录到一个值得借用的对照做法——同一实验同时设小鼠 IgG1 与小鼠 IgG2a 两支同型对照(4T1 抗 LAP 实验)。当实验组含不同亚型的抗体时,单一对照无法覆盖——本库累计已在五个模型中见到以生理盐水替代对照的做法,本条是正面范例。
6. 使用注意事项小结
- 可溶性细胞因子靶点的效应功能无益;但 LAP / 潜伏型 TGF-β 有膜结合形式,方向未定(§1)。
- “抗 LAP”这个标签不携带效力信息——28G11 有效、16B4 无效(§2)。同靶点不同克隆的功能可以相反。
- TGF-β 通路三类靶点的剂量档不同:成熟体 10 mg/kg、潜伏型 10–30 mg/kg、受体 40 mg/kg(§4)。
- 首剂静脉、后续腹腔是本页多条记录的给药方式,不要简化为单一途径(§3.1)。
- 降量方案(负荷 + 维持)常见,且对照亦应同步降量(§3.2)。
- 只测原发瘤会严重低估 TGFβRII 的作用(EMT6 中原发瘤 28% vs 肺转移 84%)(§4)。
- 1D11 是跨种属抗体,在异种移植与同源模型中均可用(§4)。
- 同一实验含不同亚型抗体时,须设多支同型对照(§5.1)。
7. 证据缺口
- 未检索到本页任何靶点以恒定区为变量的对比实验——§1 的 Fc 判断为机制推论。
- 28G11 与 16B4 的功能差异原因未见说明(表位?亲和力?对潜伏复合物活化的影响?)——这是本页最值得追的一条。
- 28G11、16B4、hT0947AE07-SG191、MT1、Ab1 均未上市,无法直接采购。
- 1D11、XMG1.2、R2-9A5 的亚型未全部检索到。
- 本页绝大多数剂量记录来自专利实施例,同行评议来源仅见于 CT26 与 4T1 的少数条目。
- IL-12p75(R2-9A5)、LIF、IL-10 的具体剂量数值缺失。
- 未检索到本页克隆的 ADA 数据、靶点结合确认或暴露量测定。
8. 参考文献
- Dahan R, et al. Cancer Cell. 2015;28(4):285-295. PMID 26373277.(Fc 主线)
- Martin RM, Brady JL, Lew AM. J Immunol Methods. 1998;212(2):187-92. PMID 9672206.(品系与恒定区)
- Liang WC, et al. J Biol Chem. 2006;281(2):951-961.(跨种属抗体的价值,可与 1D11 对照阅读)
- Percie du Sert N, et al. The ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410.
- 专利出处: US11130802 / US11230601(抗 LAP 28G11 与 16B4 在 4T1 中的头对头)、US11312767 / US12371483(抗潜伏型 TGF-β1 在 EMT6 中的方案)、US11881286(1D11 与 6E11 的联合方案及降量对照)、US8147834(TGFβRII 的 MT1 与 TGF1)。
- 供应商资料(◇ 级): Bio X Cell、Invitrogen / eBioscience、Cytek Biosciences。各模型的完整文献列表见对应模型页。
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